Самый быстрый тест на коронавирус

Как найти «границу» Т-клеточного иммунного ответа

В своей работе ученые опираются на единственное на сегодняшний день длительное проспективное наблюдение за людьми с Т-клеточным иммунитетом, результаты которого представила британская компания Oxford Immunotech. Она разрабатывает схожую тест-систему, которая отличается от ноу-хау НМИЦ гематологии набором фрагментов вируса, на которые детектируется ответ. Ученые Oxford Immunotech в течение четырех месяцев отслеживали состояние здоровья добровольцев, которых протестировали на наличие Т-клеточного ответа SARS CoV-2. В выборке пациентов с низким уровнем Т-лимфоцитов заболело около 1%, в то время как высокий Т-клеточный ответ обеспечил надежную защиту: в этой группе не заболел никто, при том, что антитела к SARS CoV-2 были далеко не у всех. Это позволяет надеяться, что часть людей из группы с высоким Т-клеточным ответом, которые ранее не болели, не заболеет COVID-19 и в будущем.

«В перспективе мы сможем установить «границу» Т-клеточного ответа, при пересечении которой, человек, скорее всего, не заболеет. А для тех, кто ее не пересек, возможно, болезнь будет протекать легче. Но для того, чтобы провести такие исследования, требуется время», — отметил Алексей Титов.

Ученые НМИЦ гематологии планируют завершить разработку теста уже зимой 2021 года. В ближайшее время он будет использоваться только в исследовательских целях. Однако на основе той же технологии работают некоторые тесты на латентный туберкулез (Т-спот), поэтому не исключено, что как минимум те же лаборатории, которые предоставляют такую услугу, смогут проводить тестирование.

Разработкой теста на определение Т-клеточного иммунитета занимается, например, компания Adaptive Biotechnologies в США. В основе их технологии лежит совсем другой принцип, чем в разработке НМИЦ гематологии: американцы намерены выявлять Т-клетки, специфичные к вирусу по присущим им уникальным молекулам. Какой из подходов окажется более совершенным, покажет время, считает Титов.

В России

В России используется ПЦР-система, разработанная и выпускаемая Государственным научным центром Вектор и Центром стратегического планирования Минздрава России. Частные компании тестированием на коронавирус не занимаются.

Самостоятельно сдать анализы не получится. Обследование проводится только в нескольких случаях:

️ Если прилетели из стран, где сильно распространён коронавирус.
️ Были тесные контакты за последние 14 дней с лицами, находящимися под наблюдением по коронавирусу, которые в последующем заболели.
️ Были тесные контакты за последние 14 дней с лицами, у которых лабораторно подтверждён диагноз COVID–19.
️ Если поставлен диагноз пневмония.

Разработка экспресс-тестов в России ведётся. 19 марта Система-Биотех создала тест, способный определить заболевание за два часа.

В ближайшее время компания подаст в Роспотребнадзор регистрационное досье на разработку. Сколько времени займёт эта процедура и когда начнётся массовое производство, неизвестно.

Учёные из Троицкого инженерного центра, входящего в Роснано, разработали прибор для определения вируса у человека.

Устройство ещё должно пройти клинические испытания и получить разрешение Минздрава. Предположительно, массовое производство начнётся летом.

Время тестирования: 30 минут

iPhones.ru

В России разрабатывают сразу два экспресс-теста.

В США

14 марта президент США Дональд Трамп заявил, что Google сделает сайт, позволяющий понять людям, нужно ли им сдавать тест на коронавирус.

Позже выяснилось, что этот сайт разрабатывала не Google, а Verily, компания входящая в состав Alphabet. При этом Verily работает только для жителей Калифорнийского залива и носит статус пилотного проекта.

Пройти тест на коронавирус также можно на парковках Walmart в Чикаго. Работники возьмут ДНК на анализ, результат скинут на электронную почту.

21 марта Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США одобрило экспресс-тест, разработанный компанией Cepheid.

Тест был разработан для работы на любой автоматизированной системе GeneXpert Cepheid. В больницах США их насчитывается около 5 тысяч.

Время тестирования: 45 минут

Фармакологические свойства

Коронавирус — это РНК-вирусы с оболочкой, которые широко распространены среди людей, других млекопитающих и птиц и вызывают респираторные, кишечные, печеночные и неврологические заболевания. Известно, что шесть видов коронавирусов вызывают заболевание человека. Четыре вируса — 229E, OC43, NL63 и HKU1 — распространены и обычно вызывают симптомы простуды у иммунокомпетентных людей. Два других штамма — тяжелый острый респираторный синдром коронавирус (SARS-COV) и ближневосточный респираторный синдром коронавирус (MERS-COV) — имеют зоонозное происхождение и были связаны со смертельным заболеванием.Коронавирус является зоонозными, что означает, что они передаются между животными и людьми.Общие признаки инфекции включают респираторные симптомы, лихорадку, кашель, одышку и затрудненное дыхание. В более тяжелых случаях инфекция может вызвать пневмонию, тяжелый острый респираторный синдром, почечную недостаточность и даже смерть.Стандартные рекомендации по предотвращению распространения инфекции включают регулярное мытье рук, прикрывание рта и носа при кашле и чихании, тщательное приготовление мяса и яиц. Избегайте тесного контакта с кем-либо, у кого проявляются симптомы респираторного заболевания, такие как кашель и чиханье.

А как насчет тестов, когда у пациента берут кровь?

Это анализ на антитела. При попадании в организм человека инфекции, его иммунная система начинает вырабатывать специальные антитела — иммуноглобулины (обозначаются аббревиатурой Ig). В случае с коронавирусом в основном вырабатываются два вида антител:

• IgM — они появляются в течение 3-5 дней после инфицирования и остаются в организме до 30-35 дней; обнаружить иммуноглобулины М можно в течение инкубационного периода и во время болезни;
• IgG -именно эти антитела атакуют вирус в организме; остаются в крови человека в течении нескольких месяцев, или даже лет — поэтому их можно обнаружить в крови даже после выздоровления;

Результат анализа определяется за счет сочетания иммуноглобулинов, которые присутствуют в крови:

• Есть IgM, но нет IgG — возможна острая инфекция, рекомендуется подтвердить заболевание ПЦР-тестом
• Есть и IgM, и IgG — возможна текущая инфекция, начало выздоровления или недавно перенесенное заболевание
• Нет IgM, но есть IgG — пациент уже переболел коронавирусом
• Нет ни IgM, ни IgG — пациент не болеет и не болел Covid-19

Существует два вида анализов на антитела, в обоих случаях врач берет у пациента анализ крови.

Первый тест называется ИФА — иммуноферментный анализ. Другое название этого теста — ИХЛА, иммунохемилюминесцентный анализ. Этот тест не только покажет наличие антител IgM и IgG, но даже их количество. Другими словами, находится ли пациент в стадии болезни, или у него уже сформирован иммунитет. Для этого анализа возьмут кровь из вены.

Второй вид теста на антитела — иммунохроматографический экспресс-анализ. Позволяет быстро выяснить, болел ли пациент — или, может, болеет прямо сейчас. Для этого теста нужна кровь из пальца, или из вены.

Тест на антитела быстрее, чем ПЦР — результат можно узнать за день. А вот точность у него ниже — специалисты называют цифру в районе 60-65 %.

Цена анализа зависит не в последнюю очередь от скорости его проведения: одна и та же клиника может просить 700 рублей за анализ с результатом через два дня, и 900 рублей — за тот же самый анализ с результатом за день. Впрочем, на цену влияет и тест-система, которую используют в анализе. Как итог, тестирование может стоить в районе 1300-1800 рублей, а порой цена может доходить даже до 2500 рублей.

ИХА иммунохроматографический тест, примеры

В июне был зарегистрирован первый российский ИХА тест ООО “ХЕМА РЗН 2020/10218

“Набор реагентов для иммунохроматографического выявления антител к вирусу SARS-CoV-2 в сыворотке (плазме) крови “ХЕМАТест анти-SARS-CoV-2″, серии (партии): А2004, С2004
Состав: 1. Кассета – 20 шт. 2. Буфер для образца -1 флакон (4 мл). 3. Инструкция по применению.”

Позже были зарегистрированы еще несколько ИХА тест-систем.

Например:

Набор реагентов “Тест-система иммунохроматографическая для качественного выявления антител IgG / IgM к коронавирусу SARS-CoV-2 в образцах сыворотки, плазмы или цельной крови человека” “ИМБИАН-SARS-CoV-2 IgG/IgM ИХА”, серии: № 20061, №20062, ООО “ИМБИАН ЛАБ”.

Набор реагентов “Тест-система иммунохроматографическая для качественного дифференцированного выявления антител IgM/IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 в образцах сыворотки, плазмы или цельной крови человека” “ИХА-СOVID-19-IgM/IgG” по ТУ 21.20.23-300-70423725-2020, ЗАО “ЭКОлаб”.

Тесты системы доступны в разных комплектациях.

Также в России широко используются незарегистрованных ИХА тесты различного происхождения, в условиях пандемии это разрешено.

Про все доступные в России тесты можно почитать в материале:

В #Хрониках Здравоохранения тема анализов на коронавирус рассмотрены более чем в десяти текстах. Разобраны все основные моменты – типы тестов, анализ результатов тестов, правильные схемы тестирования, модели тестирования в Москве, России и мире:

Последнии новости:

Главная тема как защитить себя и своих близких. Всем здравия!

Опубликовано 11.06.2020, версия 0.92 от 16.10.2020

Медицинский раздел на Рулимс

Посвящается Григорию,

помолитесь об его упокоении

Медицине и здравоохранению на Рулимс посвящено несколько десятков текстов:

Охватывается максимально широкий круг тем, несколько примеров.

Как проходит тестирование на коронавирус

На данный момент во всём мире используют диагностику с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Она состоит из нескольких этапов:

1. У пациента берут мазок из носа или ротоглотки.2. Его передают в лабораторию, которая выявляет рибонуклеиновую кислоту SARS-CoV-2 (штамм коронавируса).3. С помощью ПЦР фрагмент ДНК размножается в термоциклере для поиска вируса. Если врачи находят штамм SARS-CoV-2, то пациенту ставится положительный диагноз.

Этого метода также придерживается Всемирная организация здравоохранения, но у него есть несколько минусов:

️ Нехватка оборудования в больницах. Это проблема встречается во всех странах. Она связана с тем, что нужно проверить большое количество людей в сжатые сроки.

️ Точность. В большинстве случаев диагностика ПЦР не ошибается. Однако бывают ситуации, когда результаты оказываются неверными. Это может произойти из-за неправильной транспортировки или неверно взятых анализов.

️ Время. Тест длится около 5 часов, плюс время на доставку ДНК.

Генетический анализ

Для чего нужен: инструмент эпидемиологов и исследователей SARS-CoV-2

Кому сдавать: недоступен для массового использования

Комментарий: Метод аналогичен ПЦР-исследованию, но в сравнении с ним имеет высокую стоимость и малую пропускную способность, поэтому в меньшей степени подходит для массового использования. Генетический анализ проводится с помощью технологии секвенирования, которая анализирует фрагменты вирусной ДНК или РНК. Его точность приближена к 100%, к тому же, он позволяет обнаружить мутации в вирусе, что помогает ученым отследить перемещения SARS-CoV-2 и оценить его опасность.

Почему вокруг антител к COVID-19 возник ажиотаж?

Иммунная защита от любых инфекций, в том числе от SARS-CoV-2, не сводится к одним лишь только антителам, или так называемому гуморальному иммунитету. Есть еще и клеточный иммунитет, представленный Т-лимфоцитами.

Т-лимфоциты — самая многочисленная популяция лимфоцитов, составляющая 70-90% лимфоцитов крови. Они образуются в вилочковой железе — тимусе (отсюда их название), поступают в кровь и лимфу и заселяют периферические органы иммунной системы (лимфатические узлы). Главная функция Т-лимфоцитов — распознавание чужеродных антигенов, синтез цитокинов, стимулирующих В-лимфоциты и другие клетки для участия в иммунных реакциях.

Сегодня все разговоры свелись к антителам, потому что мы хорошо изучили антительные иммунные ответы и умеем их измерять. Т-клеточный иммунитет сложнее устроен: у разных людей Т-лимфоциты будут производить разное соотношение активных компонентов — интерферонов, цитокинов и так далее. Пока мы еще не научились измерять Т-клеточный иммунитет таким образом, чтобы на уровне популяции создать дешевый и надежный диагностический тест. Эта проблема биотехнологическая, и она пока не решена. Конечно, специфические тесты существуют, но они очень сложные, проводятся только в научных лабораториях и за большие деньги.

Тесты на антитела тоже нужно делать с осторожностью

Важно понимать, что антитела бывают разные. Представьте, что вирус — это модель машинки

У машинки есть бампер, крыша, колеса, руль, мотор и прочие запчасти. А антитела — это такие объекты, которые можно на эту машинку навесить, чтобы затормозить ее движение или вовсе остановить. Антитело можно навесить на бампер, на крышу, прикрепить на колеса, к днищу и так далее. И все эти антитела будут обладать разными характеристиками. Если антитело поместить на бампер, оно вряд ли помешает машинке ехать, а если оно окажется на руле и его заблокирует, то машинка поедет хуже или не поедет совсем. А еще антитело может зацепиться за тормоза или мотор — что будет еще эффективнее препятствовать движению машинки. Это — те самые нейтрализирующие антитела.

Тесты, которые определяют наличие клеточного иммунитета в России, измеряют в целом наличие антител в крови. Это не значит, что у человека нет нейтрализирующих, просто эти тесты их не измеряют. Конечно, если общий уровень антител по анализу получается очень высоким, то можно предположить, что среди всего этого массива есть и нейтрализирующие. Но это будет лишь догадкой.

Поэтому результаты, которые люди сейчас получают, мало о чем говорят конкретному человеку. В лучшем случае вы узнаете, что недавно встречались с вирусом, если у вас будут детектированы в крови антитела Ig M. Но скорее всего вы и так об этом знали, потому что, например, кашляли или плохо себя чувствовали. Если вы обнаружите у себя антитела Ig G, это будет говорить лишь о том, что вы переболели. То есть у вас есть какой-то уровень антител, но сколько из них нейтрализирующих? На этот вопрос тест, увы, не отвечает

Еще важно понимать, что такая диагностика отражает то, что происходит у вас в организме здесь и сейчас. Если вы пройдете тест через месяц, возможно, у вас этих антител будет меньше или не будет совсем

Такое происходит с довольно большим количеством людей.

Для конкретного человека данные о наличии антител в крови большого значения не имеют. Они важны для органов надзора за эпидемиологической ситуацией. Когда все эти результаты будут собраны воедино, специалисты смогут сказать сколько процентов людей переболело, и насколько в целом сильный антительный ответ на инфекцию фиксируется в той или иной группе людей — например, у медработников.

Подписывайтесь на Telegram-канал РБК Тренды и будьте в курсе актуальных тенденций и прогнозов о будущем технологий, эко-номики, образования и инноваций.

Способ применения

Позвольте тесту, образцу, буферу и / или контролю достичь комнатной температуры (15-30 ° C) перед тестированием.

1. Извлеките тестовую кассету из пакета и используйте ее в течение одного часа. Наилучшие результаты будут получены, если испытание будет выполнено сразу после открытия пакета из фольги.
2. Поместите кассету на чистую и ровную поверхность.

Для образца сыворотки или плазмы:

Держите пипетку вертикально, вытяните образец до линии заполнения (приблизительно 10 мкл) и перенесите образец в лунку для образцов (S), затем добавьте 2 капли буфера (приблизительно 80 мкл) и запустите таймер (смотрите иллюстрацию ниже).

Для образца цельной крови Venipuncture:

Держите капельницу вертикально и перенесите 1 полную каплю цельной крови (приблизительно 20 мкл) в лунку для образцов (S), затем добавьте 2 капли буфера (приблизительно 80 мкл) и запустите таймер (смотрите иллюстрацию ниже).

Для образца цельной крови:

Для использования капиллярной трубки: заполните капиллярную трубку и перенесите приблизительно 20 мкл образца цельной крови из пальца в область образца тестовой кассеты, затем добавьте 2 капли буфера (приблизительно 80 мкл) и запустите таймер. (смотрите иллюстрацию ниже).3. Дождитесь появления цветной линии. Ознакомьтесь с результатами через 10 минут (не интерпретируйте результат через 20 минут).Примечание: рекомендуется не использовать буфер после 6 месяцев после открытия флакона.

Расшифровка результатов

IgG ПОЗИТИВНО: * Появляются две цветные линии. Одна цветная линия всегда должна появляться в области контрольной линии (C), а другая линия должна находиться в области линии IgG.IgM ПОЗИТИВНО: * Появляются две цветные линии. Одна цветная линия всегда должна появляться в области контрольной линии (C), а другая линия должна находиться в области линии IgM.IgG и IgM ПОЗИТИВНО: * Появляются три цветные линии. Одна цветная линия всегда должна появляться в области контрольной линии (C), а две тестовые линии должны быть в области линии IgG и области линии IgM.ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ: одна цветная линия появляется в области контрольной линии (C). Никакой линии не появляется в области IgG и области IgM.НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ: контрольная линия не отображается. Недостаточный объем образца или неправильные процедурные методы являются наиболее вероятными причинами отказа контрольной линии. Просмотрите процедуру и повторите тест с новым тестом. Если проблема сохраняется, немедленно прекратите использование тестового набора и обратитесь к местному дистрибьютору.* примечание. Интенсивность цвета в областях тестовой линии может варьироваться в зависимости от концентрации антител 2019-nCov, присутствующих в образце. Поэтому любой оттенок цвета в области тестовой линии следует считать положительным.Внутренний процедурный контроль включен в тест. Цветная линия, появляющаяся в контрольной области (C), является внутренним процедурным контролем. Это подтверждает достаточный объем образца и правильную методическую методику.

Принцип действия иммунохроматографического теста-анализа

ИХА тест-анализ схема

При погружении теста в физиологическую жидкость она начинает мигрировать вдоль полоски по принципу тонкослойной хроматографии. Вместе с жидкостью движется жидкая фаза тест полоски содержащая антитела с красителем. Если в этой жидкости присутствует исследуемый антиген (гормон, онкологический или инфекционный маркер), то происходит его связывание, как с первым типом антител, так и со вторым. При этом происходит накопление антител с красителем вокруг антител. Визуально накопление антител с красителем проявляется в виде окрашивания тест полоски. Свободные антитела с красителем мигрируют далее вдоль полоски и неизбежно взаимодействуют с вторичными антителами в контрольной зоне, где и наблюдается вторая окрашенная (контрольная) полоса.

К – контрольная полоса

Т – тест зона

ИХА тест на антитела показывает заражен ли человек в настоящее время (IgM) и перенес ли человек инфекцию ранее и получил ли иммунитет к повторному заражению (IgG).

ИХА тест в отличие ИФА (ИХЛА) тестов обычно качественный, а не количественный.

Особенности платного тестирования

Сдать платно биоматериал на обследование могут только те, кто не контактировал с людьми, инфицированными коронавирусом. Диагностика не проводится, если у человека есть признаки гриппа или любого острого респираторного заболевания. При оформлении заявки обязательно наличие паспорта. Исследование не может быть проведено на условиях анонимности. Предварительно персонал клиники обязательно соберет анамнез. Необходимо предоставить достоверную информацию о посещении зарубежных стран, возможных контактах с инфицированными.

Любой вид тестирования не гарантирует 100% точности и может давать как ложноотрицательные, так и ложноположительные результаты. О такой вероятности развития событий предупреждают разработчики систем в приложенной аннотации. Поэтому следует выбирать клиники, где исследования проводятся с помощью хорошо зарекомендовавших себя тестов.

Как работает

Максимальная аналитическая чувствительность в диагностике коронавирусной инфекции характерна для полимеразной цепной реакции (ПРЦ). Проведение исследование позволяет обнаружить в биологических образцах пациента даже микроскопические фрагменты РНК возбудителей. Благодаря лабораторному тестированию одновременно выявляется принадлежность вируса к определенному генотипу. А для обнаружения уже сформировавшегося иммунитета выполняется тест по методу ИФА.

Полимеразная цепная реакция

Это наиболее информативный метод диагностики коронавирусной инфекции. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют РНК возбудителей патологии, находящихся в пробах биологического материала, в том числе крови. Даже при наличии одного фрагмента обнаруживается его присутствие, определяется видовая принадлежность вирусов. Своевременное проведение анализа ПЦР позволяет избежать развития инфекционных осложнений, самым грозным из которых является пневмония.

Для чего необходимо подобное лабораторное тестирование:

• подтверждения первичного диагноза;
• установления вирусной нагрузки;
• выявления тяжести течения заболевания и возможной смешанной инфекции;
• определения лечебной тактики с учетом генотипов вируса;
• оценки динамики проводимой терапии противовирусными средствами или иммуномодуляторами.

В биообразцы добавляют реагенты, а затем держат в термостате при определенной температуре. Это позволяет создать оптимальные условия для клонирования фрагментов вирусной РНК. Ее нити разъединяются, что способствует присоединению специфического праймера, запускающего клонирование. Это своеобразная затравка для синтеза цепи в процессе репликации, входящая в набор реагентов современных тест-систем.

Наиболее информативны тест-системы на коронавирус, принцип действия которых основан на ПРЦ

Полезная информация! По оценке Росздравнадзора зарегистрированные в РФ тест-системы для диагностики коронавирусной инфекции имеют 95% точность. Возможность ошибки вероятностью в 5% приходится на случаи неправильного сбора или обработки биообразца для анализа и нарушений при его перемещении и хранении.

Иммуноферментный анализ

Примерно через 6-7 недель в системном кровотоке зараженного человека начинают обнаруживаться антитела. Это иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой для уничтожения вирусов. Выявляются антитела проведением иммуноферментного анализа, менее точного, чем полимеразная цепная реакция. При наличии признаков заражения на фоне его отрицательного результата назначается ПРЦ.

Обнаружить в кровеносном русле IgM или IgG возможно в лабораторных условиях за относительно непродолжительное время. В основе иммуноферментного анализа лежит реакция антиген-антитело. В качестве биологического образца обычно используется сыворотка венозной крови. Ее помещают в пластиковые планшеты с несколькими лунками. В каждой из них находится определенный очищенный антиген к антителам IgG и IgM.

После внесения биообразцов в лунках происходит формирование иммунных комплексов, но работает это только при наличии в крови иммуноглобулинов на коронавирусы. На их образование указывают ферментные реакции красящих веществ с высокомолекулярными комплексами. Теперь можно с помощью определенной инструментальной методики оценить оптическую плотность, сделать вывод о результатах тестирования.

Тест на нейтрализующие антитела к рецептор-связывающему домену (RBD) белка S

Для чего нужен: Определение силы иммунитета к коронавирусной инфекции, в будущем – оценка эффективности вакцины.

Кто должен сдавать:

• Те, кто переболел коронавирусной инфекцией ив крови обнаружены антитела IgG
• Те, кто хотят узнать статус своего иммунитета к коронавирусной инфекции

Когда делать: качественный (RBD) анализ антител может проводиться с момента появления IgG в крови – с 3-4 недели с момента контакта с вирусом SARS-CoV-2.

Комментарий: Инфицирование вирусом происходит благодаря способности его мембраны соединяться с клетками организма человека. За это отвечает так называемый рецептор-связывающий домен (RBD) одного из его белков (S). Маркером перенесенной инфекции и наличия иммунитета к ней является наличие IgG к вирусу в крови. Однако количественный анализ на антитела IgG не отвечает в полной мере на вопрос, насколько сильно защищен организм.

О силе иммунитета позволяет судить качественный анализ – тест на нейтрализующие антитела к рецептор-связывающему домену (RBD) белка S коронавируса. Именно такие антитела обладают нейтрализующими свойствами и препятствуют связыванию вируса с клетками человека, тем самым обеспечивая важную роль в определении индивидуального иммунного ответак вирусу SARS-CoV-2. В случае обнаружения RBD-антител в крови, можно сделать вывод о том, что в настоящее время иммунная система организма обеспечивает защиту от коронавирусной инфекции.