Расшифровка анализа на антитела к коронавирусу

Антитела есть – иммунитета нет?

Обработанные данные, собранные на основе анализа огромного количества проведенных тестов, показали неожиданный результат, который пока не получил однозначного ответа. Дело в том, что выработка специфического приобретенного иммунитета – это стандартный привычный всем результат, и повторного инфицирования хотя бы в ближайшее время по статистике не ожидается. Однако с новым коронавирусом по-другому.

Ранее исследования показали, что у большинства переболевших COVID-19 антитела образуются в достаточном количестве, но приблизительно у 6 % пациентов – иммунитет не вырабатывается. А у некоторых переболевших после выздоровления антитела были обнаружены в малых количествах, явно неспособных обеспечить достойный отпор при повторном инфицировании.

При этом последние работы ученых выявили крайне интересные особенности, что даже после исчезновения антител из крови, иммунитет к коронавирусной инфекции остается. Это происходит благодаря памяти В- и Т-лимфоцитов – иммунных клеток, отвечающих за долгосрочный иммунитет.

Ученые полагают, что эти клетки могут стать основой создания вакцин от коронавируса, а впоследствии формирования коллективного иммунитета. Т-клетки способны распознавать патогены, с которыми организм уже сталкивался на протяжении жизни и нейтрализовать их, предупреждая развитие заболевания.

Такие клетки были обнаружены в образцах крови, взятых несколько лет назад, и ученые обнаружили, что они могут бороться с новым типом коронавируса. Люди, в то время сдававшие кровь, болеть COVID-19 не могли, но подвергались заражению другими коронавирусами, однако протекали патологии лишь при наличии простудной симптоматики.

Наличие антител в крови – не повод отказываться от защитных средств. Выявив Т-клетки, реагировавшие на новый возбудитель, в старых образцах крови, ученые сделали вывод, что иммунитет, сформированный при инфицировании другими коронавирусами, способен сохраняться длительное время и защитить человека от заражения активно распространяющимся сейчас микроорганизмом.

Именно частой подверженностью различным респираторным заболеваниям эксперты объясняют, что дети обычно легко болеют COVID-19. Вероятно, подобный механизм срабатывает и у взрослых людей, сохранивших иммунитет после ранее перенесенных простуд.

Роль в работе иммунной системы

Кому следует пройти обследование

Обследование на коронавирусную инфекцию COVID‑19 при помощи тестирования нужно для таких групп населения:

• с симптомами ОРВИ (температура, боль в горле, кашель, заложенность носа, головная боль, общая слабость);
• вернувшимся из заграничных поездок, командировок;
• контактировавшим с зараженными дома или на работе, прибывшими из очагов пандемии (Китай, Иран, Южная Корея, США, Западная Европа, Украина, Белоруссия);
• с диагнозом пневмония;
• при сомнительных признаках респираторного заболевания (например, есть только сильная слабость) в возрасте от 60 лет и сопутствующими болезнями сердца, легких, диабетом, при онкологии;
• медработникам или контактирующим с зараженными в местах изоляции;
• находящимся в закрытых коллективах (например, дом-интернат, курсанты).

Участковым врачом или прибывшим на вызов скорой помощи могут быть определены и индивидуальные показания для обследования.

Тесты на коронавирус направлены на поиск вирусной РНК, а также антител в крови. Если их назначается врач, то они проводятся бесплатно, при самостоятельном обращении в клиники или вызове на дом сотрудника частной лаборатории необходима оплата. При положительном результате потребуется изоляция, а при наличии симптомов – лечение инфекции. 

Почему результаты ПЦР исследования бывают недостоверными

МЗ РФ подтверждает информацию, что до 30% тестов на COVID-19 дают неверные результаты, но это никак не зависит от их качества. Играет роль течение заболевания, соблюдение правил забора биоматериала, его транспортировки и методики обследования.

Играет роль и место забора слизи: носо- и ротоглотка. Как ни странно, ротоглотка дает больше ложноотрицательных тестов. Больше того, если на анализ берут не секрет слизистой, а мокроту, степень ошибки в разы меньше. Это объясняется тем, что для пневмонии, которая характерна для коронавируса, не типично размножение вируса в ротоглотке.

Поэтому в сложных для диагностики случаях обязательно требуются дополнительные исследования – компьютерная томография, поскольку ценность теста на антитела к коронавируса не так велика: вирус выявляется уже после пика болезни, то есть, слишком поздно для предупреждения распространения инфицирования. Зато антитела актуальны для бессимптомников, чтобы решить, нужен карантин или нет.

Ложноположительные результаты имеют под собой чисто технические моменты.

Таблица оценки результатов анализа на антитела

Поможем расшифровать результаты.

Убедиться в симптомах.

COVID легко спутать с сезонной простудой и еще проще – с гриппом. Вот типичные симптомы:

• высокая температура от 38°С или озноб;
• кашель сухой или с небольшим количеством мокроты;
• разбитость, ломота в теле и головная боль;
• заложенность носа или насморк;
• боль в горле;
• иногда могут беспокоить тошнота, рвота и понос.

Потеря вкуса и обоняния – единственное характерное отличие COVID-19 от гриппа, на которое обращают внимание Центры по контролю и профилактики заболеваний США

Проявиться могут все симптомы сразу или только некоторые из них. Ощущения бывают как едва заметными, так и ярко выраженными.

Вызов врача на дом

Если человек узнал, что у его родственника или приятеля, с которым он недавно контактировал, обнаружен коронавирус, он должен вызвать на дом врача по месту регистрации. Специалист сделает осмотр, назначит анализ на COVID-19, а при необходимости и лечение. Забор мазка осуществляется двумя способами:

• лаборант приезжает на дом;
• пациент приходит в отведенный для этого изолированный бокс в поликлинике.

Чаще всего анализы на коронавирус берут на дому. До получения результатов пациенту не рекомендуется выходить из дома и контактировать с другими людьми. Больничный лист можно получить удаленно.

Вызов скорой помощи

При ухудшении самочувствия, появлении одышки и затруднении дыхания рекомендуется вызвать бригаду скорой помощи. Медицинская служба оценит состояние пациента и, если будут на это основания, госпитализирует его. В этом случае сдавать анализ на наличие вируса он будет в стационаре.

Частная клиника

Самый быстрый способ узнать, есть ли коронавирус, – обратиться в частную клинику. Здесь можно тоже приехать в бокс, надев маску и перчатки, или вызвать лаборанта на дом. Таким образом можно оперативно получить точный результат и дальнейшие рекомендации по лечению.

Кому надо быть особенно осторожным?

Группа риска – это те, у кого при заражении SARS-CoV-2 больше шансов получить симптомы, требующие вызова врача и госпитализации.

Вне зависимости от возраста в зоне высокого риска COVID-19:

• бывшие курильщики и курящие;
• люди с ожирением, т.е. те, у кого индекс массы тела выше 30 (рассчитать ИМТ);
• больные сахарным диабетом 2 типа;
• онкобольные;
• люди с тяжелыми проблемами сердца, легких и почек (например, с ишемической болезнью сердца, сердечной недостаточностью, ХОБЛ).

Альтернатива ПЦР-диагностике

В любом случае нужно повышать чувствительность тест-систем на основе ПЦР, заключает Алексей Чемерис, а для этого нужны другие подходы. «Надо сделать так, чтобы ложнонегативных результатов было меньше, практически исключить их», — считает он.

В обзоре, подготовленном вместе с коллегами, профессор Чемерис рассматривает преимущества и недостатки ПЦР-диагностики и других методов амплификации — копировании РНК бетакоронавирусов, к которым относится SARS-CoV-2. Теоретически весьма перспективен метод петлевой амплификации — LAMP, где используют сразу шесть или восемь праймеров.

«С одной стороны, повышается специфичность: только когда все праймеры отожгутся (сработают, распознав РНК коронавируса. — Прим. ред.), начнется амплификация, с другой — вирус мутирует и шансы, что реакция не пойдет, увеличиваются, поскольку какие бы участки генома ни выбрать, все равно вероятность мутаций больше в восьми участках, чем в двух или трех (при использовании гибридизационного зонда), достаточных для ПЦР», — объясняет исследователь.

Во время предшествующей эпидемии SARS возбудителя выявляли с помощью реакции NASBA (амплификации на основе секвенирования нуклеиновых кислот) и RCA (репликации по типу катящегося кольца). Геномный редактор CRISPR-Cas также пробуют применять для идентификации РНК нового коронавируса. Есть работы по полногеномному секвенированию любого генетического материала, находящегося в биоматериале. Метод очень чувствительный, но дорогой и долгий — занимает 20 часов. Так что в ближайшее время ПЦР с обратной транскрипцией останется самым массовым способом обнаружения коронавируса в организме.

Бывают ли ложноположительные тесты

Ложноположительные тесты ПЦР встречаются редко. Частота погрешности, когда обнаруживают РНК коронавируса, а потом это не подтверждается другими методами диагностики, не превышает 0,7-1,2%

Важно учитывать, если человек даже хорошо себя чувствует, то он может быть заражен коронавирусом, а также становится опасным для окружающих. Чаще бывают ложноотрицательные (24-78% в зависимости от метода), то есть человек болен, но тест из-за погрешности взятия материала (соскоба из носоглотки) его не показывает

Экспресс-тесты еще менее надежны, так как антитела в количестве, доступном для выявления, обнаруживают не раньше 5 дня болезни, а максимальный уровень отмечается только на 10 сутки. Поэтому по одному результату диагноз не ставят, исследование повторяют, учитывают данные рентгенографии (томографии), других анализов крови. Есть случаи, когда потвердеть коронавирус удалось только с 5 раза.

По рекомендации Департамента здравоохранения Москвы, человеку без симптомов нужно пройти тестирование 2 раза, а при наличии температуры, кашля, боли в горле или других подозрительных на заражение симптомов необходимо минимум 3 теста.

Причины

На конгрессе под названием «Человек и лекарство», который проходил в апреле 2020 г., главный внештатный пульмонолог Министерства здравоохранения С. Авдеев заявил:

– Точность имеющихся ПЦР-систем для диагностики Covid-19 составляет 70-80%. Такая оценка была дана им на основании исследований с участием 1400 человек. – Следовательно, у остальных 20% результат может быть ложноположительным или ложноотрицательным.

Министр здравоохранения России М. Мурашко в своем интервью телеканалу «Россия-1» сказал, что врачи могут ставить предварительный диагноз «коронавирус» до подтверждения его результатами анализов:

– Диагноз выставляется без лабораторных доказательств, по клиническим симптомам. Это нормальная практика для врачей, – отметил министр.

Даже при позитивном результате ПЦР человек может быть здоров сам, если болезнь протекает бессимптомно, и почти не представлять угрозы для окружающих. Однако определенная степень риска передачи инфекции все же остается, поэтому ВОЗ и Минздрав РФ рекомендуют таким гражданам соблюдать карантин и использовать защитные средства ради безопасности других.

Важность ориентации на наличие симптоматики подчеркивает главный фтизиатр России И. Васильева:. – Примерно 80% случаев Covid-19 протекают в легкой форме, без серьезных осложнений

Ехать в стационар при слабовыраженных признаках смысла никакого нет. Более того, если уровень насыщения крови кислородом больше 96%, то даже при истинноположительном тесте и наличии изменений на КТ пациенту лучше остаться дома. Исключение составляют случаи, когда есть дополнительные показания для госпитализации – в частности, хронические патологии, – разъясняет фтизиатр

– Примерно 80% случаев Covid-19 протекают в легкой форме, без серьезных осложнений. Ехать в стационар при слабовыраженных признаках смысла никакого нет. Более того, если уровень насыщения крови кислородом больше 96%, то даже при истинноположительном тесте и наличии изменений на КТ пациенту лучше остаться дома. Исключение составляют случаи, когда есть дополнительные показания для госпитализации – в частности, хронические патологии, – разъясняет фтизиатр.

Где сдавать

Период активности: сколько «живут» иммуноглобулины

Какие бывают тесты

Может ли ПЦР ошибаться

А что, если результаты – неверные, «ложноположительные»?

Речь идет не только о сбоях тест-системы при исследовании образцов, но и о неспецифической реакции. Дело в том, что антитела М не отличаются особой избирательностью и могут вырабатываться в ответ на воспалительные, аутоиммунные процессы. Кроме того, они часто появляются на фоне беременности и гормональных сбоев.

Учитывая данный факт, результаты тестов на антитела должны подтверждаться данными анализа мазка-ПЦР, иначе диагноз может быть неточным.

Ложноположительные результаты на определение антител G бывают реже, чем у глобулинов М

В свою очередь, и ПЦР-анализ нередко дает недостоверные сведения, что связано с поведением вируса в организме. Иногда его молекулы сразу оказываются в нижних дыхательных путях или постепенно вымываются со слизистых носоглотки. Следовательно, в образец вирионы просто не попадают несмотря на их присутствие в организме. Вот почему рекомендуется сдавать оба анализа.

Когда лучше сдавать

Мазок на коронавирус необходимо сдавать при наличии характерных признаков Covid-19, среди которых отмечаются следующие:

• подъем температуры тела;
• сухой, непродуктивный кашель, иногда с примесью крови;
• ломота в мышцах и суставах;
• утомляемость, снижение работоспособности;
• ухудшение аппетита;
• боль и сдавленность в груди;
• боль в горле, заложенность носа;
• кожные высыпания;
• одышка, затрудненное дыхание;
• потеря обоняния и вкуса.

Приоритетное право на сдачу анализа по полису ОМС имеют граждане:

• больные пневмонией;
• имевшие контакты с лицами, у которых подтвержден Covid-19;
• имеющие признаки ОРВИ после возвращения из регионов с неблагополучной эпидемиологической обстановкой;
• граждане старше 65 лет, у которых отмечаются признаки простуды;
• люди с хроническими патологиями – онкологическими, эндокринными, сердечно-сосудистыми и др.;
• переболевшие Covid-19, которым нужно подтвердить отрицательный статус.

Те, кто не входит в этот перечень, сдают анализы на платной основе в коммерческих медклиниках.

Информативность анализа на антитела

Для выполнения количественного тестирования на антитела кровь берут из локтевой вены, помещают ее в маркированную пробирку и отправляют в лабораторию, где и проводится исследование. На любом из этих этапов может произойти сбой, который негативно отразится на результатах анализа. Ложноположительные результаты обычно бывают из-за ошибок сотрудников лаборатории, например, неправильном хранении биоматериала. А также по вине медперсонала, забирающего кровь у пациента.

А вот ложноотрицательные результаты в большинстве случаев получаются из-за неправильной подготовки к исследованию. Что избежать пересдачи крови, нужно соблюсти ряд условий:

• за сутки не пить кофе, алкоголь, не употреблять жирных продуктов;
• не принимать препараты с противомикробным, противовирусным или антибактериальным действием;
• не есть утром перед сдачей крови.

Последнее условие только кажется трудновыполнимым — забор биоматериала начинается сразу после открытия поликлиник. Так что голодать приходится не более 2 часов.

Как узнать, есть ли антитела к коронавирусу?

Для исследования у человека берется небольшое количество крови с пальца или из вены и подвергается тестированию на антитела класса G (IgG). Полученный результат оценивается и дает возможность сделать выводы о наличии или отсутствии антител к коронавирусу.

Что показывает тест на антитела к коронавирусу?

В крови человека, болеющего или переболевшего коронавирусом, обнаруживается иммуноглобулин (антитела):

• IgM – болезнь находится в острой стадии;
• IgG – человек перенес заболевание, иммунитет формируется.

В зависимости от наличия того или иного вида антител тест покажет соответствующий результат.

Результаты теста на антитела к Covid-19

Существует пять вариантов интерпретации анализа:

IgM

Тест на антитела к коронавирусу положительный или отрицательный – что это значит?

В зависимости от результата теста определяется дальнейшая тактика работы с пациентом:

Метод ИФА

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) по своему принципу довольно прост. Для определения наличия антител в крови используются микропланшеты (пластиковые пластины), покрытые вирусным белком. При попадании на такую пластину крови пациента происходит реакция, дающая возможность выявить наличие или отсутствие в ней специфических антител. Отличается максимальной точностью результата.

Метод ИФА бывает:

• качественным — ответ подразумевает наличие или отсутствие искомого вещества в образце, дает ответ болел человек или нет, как давно болел;
• количественным (полуколичественный) — позволяет не только определить болел или нет, но и дает оценку концентрации антител в крови пациента. Это позволяет выяснить, насколько сильно отвечает иммунитет на вирусное заражение, может ли человек стать донором антител.

Для анализа берется кровь из вены. Результат будет известен через 1-3 дня. Для проведения исследования требуется специальное оборудование.

Метод ИХЛА

Расшифровывается, как иммунохемилюминесцентный анализ, тестирование ИХЛА является модификацией ИФА. Он более чувствителен к специфическим антителам, точность анализа составляет 90 %. Антитела определяются иммунной реакцией антигена с антителом. Для получения результата необходимо дополнительное оборудование.

Метод ИХА

Иммунохроматографический анализ (ИХА) относят к экспресс-тестам. Результат можно оценить уже через 15 минут. Метод не требует никакого оборудования и тестирование может проводиться в любых условиях. Принцип определения аналогичен тестам на беременность: используются полоски, кассеты или панели.

Этот вид анализа основан на разделении частиц методом парной связки и реакции между антителом в биоматериале пациента и антигеном. Берется кровь из пальца.

Экспресс-тесты на антитела методом ИХА — проводится по принципу глюкометра. По капле крови можно определить имеется или нет в крови специфический белок. Чтобы определить количество или скорость увеличения концентрации, потребуется проведение дополнительных исследований.

Результат качественный: есть или нет антитела IgM и IgG.

Подробнее

Антитела к COVID-19 исчезают слишком быстро

Есть еще одно исследование, которое показывает, что антитела против COVID-19 не остаются в организме так долго, как нам хотелось бы. Исследователи Британского Королевского колледжа проанализировали иммунный ответ более 90 пациентов и медработников Национальной службы здравоохранения. Они обнаружили, что уровни антител, которые могут нейтрализовать коронавирус, достигли пика примерно через 3 недели после появления симптомов инфекции.

Анализы крови показали, что у 60% пациентов выработалось много антител в ответ на заражение на пике борьбы с вирусом, но только у 17% был столь же высокий ответ через 3 месяца после инфицирования. За это время уровни антител упали в 23 раза. У некоторых испытуемых их даже нельзя было обнаружить.

У людей вырабатывается разумный иммунный ответ на коронавирус и вырабатываются антитела, но они исчезают через короткое время. У некоторых это происходит быстрее, а у кого-то занимает дольше времени.

Это исследование показывает, что иммунная система борется с коронавирусом разными способами. Но если антитела являются основной линией защиты, это означает, что мы можем повторно заразиться коронавирусом SARS-CoV-2, как и гриппом.