Иммуноферментный анализ крови на коронавирус (ифа-тест) в киеве

Ответы на частые вопросы

Какой титр антител к коронавирусу считается высоким? Четкие количественные критерии для систем тестирования на антитела к коронавирусной инфекции пока не выработаны. На данном этапе во всем мире осуществляется сбор и накопление сведений о новом коронавирусе, в том числе данных о его лабораторной диагностике методом ИФА. Поэтому невозможно сказать, какой именно титр антител к нему может считаться достоверно высоким. По словам Ивана Скороходова, члена ассоциации аллергологов и иммунологов России, человек, переболевший коронавирусом, может стать донором плазмы для тяжелых больных, если показатели IgG у него будут достаточно высокими

Для этого важно проконтролировать условия: титр IgG должен быть больше 40, а IgM больше или равно 1,5, или же титр IgG больше 80, а IgM больше или равен нулю

Какой титр антител указывает на то, что у человека сформировался иммунитет к коронавирусу? Чтобы сформировался иммунитет к COVID-19, показатель иммуноглобулинов IgG должен быть больше 10. Но даже если по результатам анализа обнаружены иммуноглобулины IgG в таком количестве, нельзя утверждать, что человек будет обладать стойким иммунитетом к COVID.

Максимальный уровень иммуноглобулинов класса G наблюдается спустя два-три месяца после заражения. Но клинические исследования показали, что у большинства людей, заразившихся коронавирусом, защитный титр антител существенно снижается уже через три месяца после перенесенного заболевания. А у тех, кто страдает сахарным диабетом, ожирением, аллергическими и аутоиммунными заболеваниями, титр иммуноглобулинов G начинает снижаться еще раньше – через два месяца после перенесенного заболевания. В частности, по данным ученых из Королевского колледжа Лондона, антитела к коронавирусу сохранились лишь у 17% переболевших им. Можно лишь предположить, что иммунитет к коронавирусу кратковременный. Чтобы установить, насколько стойкий иммунитет после перенесенной коронавирусной инфекции, необходимы углубленные иммунологические исследования.

Какой титр антител к коронавирусу считается достаточным? По причине отсутствия точных данных, подтвержденных клиническими исследованиями, нельзя говорить и о достаточном для дальнейшей защиты от повторного заражения титре антител к коронавирусу. Основываясь на общих закономерностях, характерных для вирусных инфекций, напрашивается вывод, что после перенесенной инфекции при повторном заражении иммунная система формирует антитела быстрее. Это значит, что при повторном инфицировании болезнь будет протекать легче.

На заметку: Считается, что результаты иммуноферментного анализа отличаются высокой точностью, но иногда (например, при перекрестной реакции с другими коронавирусами) анализ может показать ложноположительный результат. Ложноотрицательные результаты возникают и из-за недостаточной чувствительности теста. Во всех сомнительных случаях обязательно ПЦР-тестирование.

Какие показания для проведения диагностики COVID-19 с помощью ИФА?

Сдать кровь на антитела к коронавирусу необходимо в следующих случаях:

• для диагностирования активной стадии заболевания при наличии респираторных симптомов;
• для исключения заражения при установленном контакте с заболевшим;
• для уточнения диагноза заболевания при слабо выраженной симптоматике;
• для диагностики скрытых форм (носительства) коронавирусной инфекции;
• для того чтобы узнать, переболел ли человек COVID-19 и сформировался ли у него иммунитет к коронавирусу, в том числе при бессимптомном течении заболевания;
• при отборе донора для переливания крови пациентам с тяжелым течением коронавирусной инфекции.

Иммуноглобулин М при коронавирусе – показатели

При оценке значения иммуноглобулина М при коронавирусе медикам удается определить, болен ли человек. Кроме того, по количеству антител в кровяном русле можно установить, был ли контакт с зараженным. Если антитела на вирус полностью отсутствуют, можно с уверенностью сказать, что человек никогда не имел контакта с зараженным COVID-19

При этом важно обращать внимание и на второй тип антител класса G, соотношение этих иммуноглобулинов друг к другу. Но для факта инфицирования проводят простую оценку концентрации IgM

Иммуноглобулин М при коронавирусе – норма

Уровень иммуноглобулина М в крови при коронавирусе со временем только увеличивается. В норме специфические иммуноглобулины к COVID-19 должны полностью отсутствовать. Стоит отметить, что при соблюдении социальной дистанции, использовании индивидуальных средств защиты органов дыхания инфицирование при непродолжительном контакте с больным не происходит.

В случае если пациент является контактом первого уровня, необходимо соблюдать правила самоизоляции на протяжении 14 дней. Необходимо понимать, что отсутствие IgM может наблюдаться и у лиц, уже переболевших коронавирусом

В таких случаях необходимо обращать внимание на антитела G, их количество

Иммуноглобулин М повышен при коронавирусе

Увеличение концентрации иммуноглобулинов происходит постепенно. Первые единицы обнаруживаются на 3-5-й день после проникновения вируса в организм. Согласно наблюдениям врачей, максимальная концентрация иммуноглобулинов М фиксируется к 12-14 дню, после чего они исчезают из крови. Максимальное значение иммуноглобулина М, выявленного при коронавирусе, достигало нескольких десятков антител в образце сыворотке. Такие случаи были зафиксированы при тяжелом течении инфекции, с развитием крупноочаговой, двусторонней пневмонии.

Сомнительный иммуноглобулин М при коронавирусе

Наличие иммуноглобулинов даже в единичном количестве указывает на контакт с вирусом. Однако не каждый контакт приводит к развитию инфекции. Решающее значение имеют:

• состояние иммунитета;
• возраст пациента;
• наличие хронических заболеваний.

Для того чтобы сделать заключение, врачи должны учитывать, какие цифры иммуноглобулина М при коронавирусе указывают непосредственно на активную фазу инфекции. При этом антитела класса G должны полностью отсутствовать в образце. Когда концентрация IgG < 10, а IgM всего 1-2 – результат считают сомнительным. Это значит, что, возможно, человек является носителем инфекции. По прошествии 7 суток осуществляется повторное исследование.

Что это значит

В мировой практике концентрация антител оценивается в международных единицах – МЕ/мл. Это общепринятые единицы для всех производителей тест-систем. В частности, уровень иммуноглобулинов класса G к таким известным инфекциям, как краснуха, токсоплазмоз, корь измеряется именно в МЕ/мл, согласно унифицированным стандартам.

Однако на некоторых инфекционных возбудителей это правило не распространяется, поэтому используются свои единицы измерения – УЕ/мл, Е/мл, РЕ/мл и коэффициент позитивности.

КП – это математическая расчетная величина, которая зависит от концентрации антител – иммуноглобулинов. Исключение составляют так называемые ложные результаты, полученные в силу ряда объективных причин.

Расчет коэффициента позитивности при коронавирусе целесообразно проводить для определения количества антител в исследуемых пробах и в ходе наблюдений за больными. Такой показатель очень удобен: положительным считается результат от 1.0 и более.

На заметку! Чем выше уровень КП, тем больше концентрация антител в пробе.

Для чего нужен тест

Анализ на антитела, или иммуноглобулины, является дополнительным диагностическим методом, позволяющим установить:

• болен ли человек в настоящее время или уже перенес инфекцию;
• наличие в организме Sars-CoV-2 при отсутствии каких-либо симптомов или на фоне имеющихся признаков простуды;
• есть ли иммунитет к Covid-19.

Антитела представляют собой специфические белки, синтезируемые организмом в ответ на попадание чужеродных агентов – микробов, бактерий и вирусов. При большинстве уже известных инфекций первыми продуцируются антитела IqM, которые активно включаются в борьбу с патогеном. Их обнаружение в крови означает, что человек болеет в настоящий момент.

Спустя несколько суток от заражения появляются иммуноглобулины типа IqG, посредством которых иммунная система «запоминает» вражеские молекулы на случай повторной встречи. Другими словами, именно они обеспечивают формирование специфического иммунитета к конкретному возбудителю.

Коронавирусы, и в том числе новый штамм Sars-CoV-2, не всегда ведут себя так же. У инфицированных людей нередко обнаруживаются оба вида антител практически одновременно. Более того, белки типа G могут наблюдаться даже раньше, чем иммуноглобулины М.

Анализы на антитела нужны в том числе для ведения статистики заболеваемости

Особенность Covid-19 состоит еще и в том, что при «опускании» инфекции в нижние отделы дыхательных путей ПЦР-тест, который делают для ее выявления, часто дает отрицательный результат.

Именно непредсказуемость циркуляции коронавируса обуславливает необходимость комплексной диагностики. Наиболее информативным будет результат двух тестов – ПЦР и на антитела. Они позволят не только установить факт наличия инфекции, но и определить ее стадию, а также проверить, заразен ли в данный момент человек для окружающих.

Итоги теста на иммуноглобулины представляются в наполовину количественном виде: в бланке указывается «коэффициент позитивности» – цифра, характеризующая стадию болезни. Она показывает, прогрессирует инфекция или уже проходит.

Превентивная мера

Масштабное тестирование на антитела к коронавирусной инфекции дает возможность вести статистику по характеру протекания болезни у разных категорий людей. По результатам анализов можно установить, каковы ее особенности в зависимости от возраста, общего состояния здоровья и профессиональной деятельности.

Что значит сомнительный результат на коронавирус

Кроме этого, только обнаружение антител в крови покажет, является ли человек бессимптомным носителем инфекции, и опасен ли он для окружающих.

Еще одной целью сдачи таких анализов является своевременное выявление количества антител у пациентов с тяжелой формой Ковида. В зависимости от значения коэффициента позитивности решается вопрос о необходимости дополнительной иммунизации с помощью сильнодействующих средств – в частности, сыворотки крови переболевших. Если КП в пределах нормы, то человек сможет выздороветь и без лекарств.

Насколько он точный

Точность коэффициента позитивности и других данных анализа на антитела напрямую зависит от того, когда он сделан. Максимально достоверный показатель можно получить начиная с 5-7 дня с момента инфицирования, так как в это время в крови появляются иммуноглобулины класса G. Сдавать кровь раньше бессмысленно, поскольку в период инкубации вируса полной картины еще нет.

Внимание! На точность тестов влияет также метод, используемый для исследования

Референсные (референтные) значения

Какое количество антител считать достаточным

Информативность анализа на антитела

Виды антител человека

У млекопитающих, то есть и у человека тоже, существует 5 классов антител, которые получили свое название по типу тяжелых цепей:

• IgA — антитела этого класса в основном обнаруживаются в секретах нашего организма. Их можно найти в слюне, слизи, вырабатываемой в носу, в грудном молоке, в пищеварительном соке. В плазме крови их относительно немного – всего 10-15% от общего объема всех Ig. Это – наша первая линия защиты слизистых оболочек. Сами по себе IgA не имеют бактерицидных свойств, то есть не уничтожают бактерии, но они нейтрализуют токсины, которые эти бактерии вырабатывают. Они также активируют защитную иммунную реакцию организма на вторжение вирусов. Именно IgA обеспечивают специфический иммунитет новорожденных, который те получают с молоком матери.
• IgE – об этих антителах знают все аллергики. Именно эти Ig играют ведущую роль в развитии аллергической реакции, которая является проявлением гиперчувствительности иммунной системы. У аллергиков показатели IgE могут быть в 10 раз выше, чем у обычного человека. А еще IgE отвечают за иммунную реакцию на глистов. Концентрация IgE также возрастает при некоторых аутоиммунных заболеваниях, таких как псориаз или ревматоидный артрит.
• IgM – вот это очень интересный класс антител, актуальный по нынешним временам. Когда патогенный организм проникает в тело, именно эти иммуноглобулины образуются в первую очередь. Это самые тяжелые Ig из всех. Они образуют пентамеры из пяти Y-образных белковых молекул. Их вариабельные области на торчащих наружу раздвоенных хвостах Y-белков сравнивают с набором деталей из конструктора, из которых можно выстроить любую конфигурацию. Именно такая уникальная конфигурация образуется при контакте IgM с поверхностными белками вируса или бактерии. Если в крови человека много IgM, например, к коронавирусу, это значит, что инфекция на ранней стадии — человек болен.
• IgD — иммуноглобулинов этого вида в плазме крови мало, порядка 0,25% от общего объема Ig. Ученые считают, что IgD работают вместе с IgМ, дополняя их функционально.
• IgG — самые важные для нас антитела в свете пандемии коронавируса. Антител этого класса в крови больше всего – 75%, и это главный тип иммуноглобулинов. Они связываются с патогенами, попавшими в тело, и тем самым приводят к их иммобилизации и агглютинации. Когда на поверхность вируса, бактерии, грибка усаживаются IgG, эти агрессоры попадают в поле зрения клеток иммунной системы фагоцитов, которые распознают вредителя и уничтожают его. IgG не только определяют врагов, они также запускают систему комплемента, что приводит к образованию белков, необходимых для уничтожения патогенных микроорганизмов. IgG также нейтрализуют токсины. Они также содержатся в материнском молоке и даже могут проникать сквозь плаценту, обеспечивая ребенку защиту как до родов, так и в первые месяцы жизни после них. Наличие IgG к определенной инфекции в плазме крови говорит о том, что организм уже не только познакомился с инфекционным агентом, но и уже научился с ним бороться.

Итак, при иммуноферментном анализе (ИФА) анализируется наличие антител IgM и IgG. Если в плазме крови есть только антитела IgM, это значит, что человек заболел недавно и болеет на данный момент. Если есть и IgM, и IgG, это значит, что борьба с инфекцией в разгаре и иммунная система уже вырабатывает необходимые для уничтожения вируса или бактерии антитела. Если же в плазме крови определяются только IgG, это значит, что инфекция была, но организм ее успешно победил, вылечился, но все еще помнит, как с ней бороться.

Для тех, кто задается вопросом о том, сколько же вариаций антител может существовать и не закончатся ли эти варианты на протяжении жизни одного человека, уточним, что ДНК, которая кодирует вариабельные участки антител, содержит 400 вариабельных генов, 12 генов разнообразия и 4 соединительных гена. В разных комбинациях они позволяют закодировать более 200 тысяч разновидностей вариабельных областей. И это – не считая изменений нуклеотидов самих генов. По расчетам ученых, человеческий организм может произвести 100 млн разных антител, которые способны распознать практически любые существующие вещества, являющиеся для нас чужеродными. Этого за глаза хватит любому, даже очень активно контактирующему с инфекциями человеку.

Igm и igg: на страже иммунитета

После заражения коронавирусной инфекцией Sars-CoV-2 первыми в крови появляются антитела, или иммуноглобулины, iqm. Они начинают циркулировать в кровяном русле примерно с 5-6 дня инфицирования.

После 10 дня или спустя 2 недели обнаруживаются антитела igg, которые, как предполагают ученые, могут сохраняться в крови до полутора лет. При выработке популяционного (коллективного) иммунитета, когда иммуноглобулины типа G будут в крови у большинства населения планеты, и в достаточном количестве, пандемия пойдет на спад.

Наличие igm и igg выявляется путем иммуноферментного анализа на антитела разных классов Ig – M, G, A. Антитела к вирусам определяются на самых ранних стадиях, что гарантирует точную диагностику и своевременное лечение болезни.

Чаще всего инфекции диагностируются по результатам сдачи тестов на антитела igm, синтезируемые в острой фазе, и антитела igg, ответственные за формирование стойкого иммунитета. Именно эти два вида иммуноглобулинов определяют при большинстве инфекционных патологий, и коронавирус Sars-CoV-2 не исключение.

Анализ на антиковидные иммуноглобулины делают с помощью экспресс-метода, который может выдать 3 варианта результатов:

• антитела отсутствуют – значит, человек здоров и избежал заражения, либо инфекция «живет» в организме не дольше 5 дней;
• найдены иммуноглобулины igm, что служит признаком заболевания в данный момент;
• найдены оба типа антител igm и igg, что может иметь 2 объяснения – «Корона» прошла, не оставив симптомов, или идет стадия выздоровления.

Стоит отметить, что результаты анализа на антитела к Covid-19 недостаточно точные и требуют подтверждения другими исследованиями. В перспективе коронавирусные иммуноглобулины планируется использовать для профилактики и лечения Ковида, и сегодня продолжаются исследования в этом направлении.

Внимание! У человека, переболевшего Sars-CoV-2, в крови обнаруживается высокий уровень антител igg. Его значения после перенесенного Ковида аналогичны в обоих образцах, взятых с 2-х недельным перерывом.

Иммуноглобулины типа М – igm

Как только человек заразился, у него сразу же начинается выработка антител М. Они определяются в крови приблизительно на 5-й день и достигают пиковых значений в интервале от недели до месяца. После этого их концентрация постепенно снижается до диагностически ничтожных показателей, что может занять еще несколько месяцев даже без проведения терапии.

Но для точной диагностики определения уровня одного только глобулина типа М недостаточно, поскольку его отсутствие еще не свидетельствует о том, что человек не заражен. Острой стадии болезни нет, однако не исключена хроническая.

Иммуноглобулины типа G – igg

Основной функцией антител типа G является долговременная защита организма от различных патогенов. Они вырабатываются медленно, но иммунный ответ на проникновение чужеродного агента сохраняется намного дольше, по сравнению с igm.

По наличию и количеству антител можно судить о том, заражен ли человек коронавирусом, и на какой стадии находится патологический процесс

Концентрация антител igg к коронавирусу растет постепенно, в течение 15-20 дней с начала болезни, но сохраняется повышенной дольше. По их присутствию в крови можно выявить давно протекающую инфекцию, даже если igm при этом не обнаружено.

Справка: Иммуноглобулины G могут долго держаться на низком уровне, в течение многих лет, но при повторном попадании в организм того же патогена этот уровень быстро возрастает.

О методиках анализа

Что делать при IgM?

Расшифровка результатов

Для определения иммуноглобулинов к коронавирусу применяются специально разработанные тест-системы на антитела к COVID-19. При расшифровке результата анализа нужно ориентироваться на установленные для той или иной тест-системы референсные значения иммуноглобулинов. Референсные значения – это диапазон нормальных результатов анализов; его получают путем усреднения результатов при массовом тестировании здоровых людей. Поскольку лаборатории пользуются различными тест-системами, то и референсные значения могут отличаться. В частности, на сайте Мосгорздрава указаны такие референтные значения при COVID-19: для антител IqG – 10.0, для IqM – 2.0. В результатах анализа ИФА рядом с числами могут стоять буквы КП, что расшифровывается как коэффициент позитивности.

Результаты ИФА-тестирования могут быть такими:

Сравнив полученный результат анализа на антитела и показатели из данной таблицы, можно сделать предварительный вывод о наличии или отсутствии заболевания. Например, показатели IgM 1.23 и IgG 132.12 говорят о том, что человек уже переболел COVID и у него выработался иммунитет. А показатель IgM 5.57 и IgG: 8.92 значит, что это острая стадия заболевания.

Но самостоятельно расшифровывать полученные результаты небезопасно: ИФА-тест не может использоваться для окончательной постановки диагноза: он является вспомогательным способом диагностики. Кроме того, у используемых лабораториями тест-систем разная чувствительность, соответственно, могут отличаться и референсные значения IgG и IgM. Поэтому интерпретация результатов теста на антитела к COVID-19 должна осуществляться врачом на основе клинических проявлений заболевания, результатов других исследований (анализ ПЦР, КТ легких и т.д.) с учетом эпидемиологической ситуации.

ИФА-тест определяет титр антител в крови и позволяет узнать, переболел ли человек COVID-19.

Что значит положительный анализ?

Жизненный цикл igg – как долго они сохраняются в крови

Часто задаваемые вопросы

Интерпретация данных

ИГХА: быстрый и краткий ответ

Экспресс-тесты позволяют быстро (до получаса) получить результат. В них используют метод ИГХА, а не ИФА. Анализ результатов также происходит на основе уровня антител класса M и G (IgM, IgG). Эти тесты обычно качественные, специфичные, высокоточные. Отвечают на вопрос: есть иммунитет или нет.

В начале заболевания или подозрении на него следует проводить первым тест ПЦР. Оптимально сделать ПЦР тест одновременно с исследованием уровня антител в крови или сразу после получения положительного результата мазка. ИФА и ПЦР тесты дополняют друг друга.

По данным Роспотребнадзора, на 30 сентября 2020 года проведено более 46 миллионов заборов биоматериала людей на наличие SARS-CoV-2. Россия сейчас на втором месте среди всех стран по общему количеству проведенных тестов на обнаружение нового коронавируса. Такой охват поможет повысить качество используемых реактивов и скорректировать диагностические значения уровня антител.

Трактовка полученного результата

Результаты положительные: что дальше?