Диагностика коронавирусной инфекции covid-19: какой лучше сдать анализ

ИФА

ПЦР-тест-системы, как и КТ-диагностика выявляет COVID-19 в острой фазе. Однако весьма актуальна и информация об уже переболевших, на основании которой можно судить об охвате населения заболеванием, а также о числе бессимптомных случаев. Ответы на эти, а также на многие другие вопросы, может дать тест-система на антитела. На сегодняшний день разрабаткой таких тест-систем помимо «Вектора» занимаются такие организации как «Вектор-Бест», ООО «НПО «Диагностические системы», ФНКЦ ФХМ ФМБА России, «МБС-Технологии», а также «Генетико» и Институт молекулярной биологии РАН . К сожалению, тест-системы на антитела требуют намного больших усилий и времени на разработку, чем ПЦР-системы, а их чувствительность и специфичность оставляет желать лучшего. Так, проведенное в США исследование доступных система на антитела показало, что лишь 3 из 14 систем дают надежные результаты (т.е. не более 1% ложноположительных результатов), но при этом их чувствительность не превышает 90% относительно положительных контрольных образцов []. Какова будет чувствительность и специфичность разрабатываемых российских систем — пока неизвестно.

Сделаем краткие практические выводы:

В первые пять дней болезни — ПЦР-диагностика будет достаточно эффективна
Идеальный вариант — тестирование с выездом на дом в тех лабораториях, которые используют системы с контрольными образцами,  о чем мы писали выше. 

Если тест дал отрицательный результат или прошло больше пяти дней от начала болезни, а симптомы сохраняются, то в этом случае поможет с диагностикой КТ; при этом пациентам важно напомнить о соблюдении всех меры предосторожности при нахождении в медицинских организациях. 

Проводить ИФА при текущей низкой точности — едва ли имеет смысл. 
Если симптомов нет, но был контакт, в принципе можно пройти ПЦР-диагностику, но лучше всего на 14 дней уйти на самоизоляцию и наблюдать за самочувствием.. Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет
Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет. Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Отвечаем на вопросы о системе НМиФО в прямых эфирах Вконтакте: https://vk.com/medznanie_ru 

Обсудить последние новости со всеми коллегами России вы можете в чатах:

• WhatsApp: https://chat.whatsapp.com/Izj3ZQ7aI36KK8e2dCjcm4
• Telegram: https://tglink.ru/joinchat/GWBPCkkLipQUnTbXrKqzGA

Регистрируйся на нашем сайте и получай доступ к актуальным образовательным вебинарам

Также читайте статьи: Каким будет сценарий эпидемии COVID-19 в РФ (графики для РФ, Италии, Южной Кореи и США), Правда и мифы о коронавирусе (COVID 19), Вопрос жаропонижающих при коронавирусе: только не НПВП или почему бы и нет?

Количественный тест на антитела

Альтернатива ПЦР-диагностике

В любом случае нужно повышать чувствительность тест-систем на основе ПЦР, заключает Алексей Чемерис, а для этого нужны другие подходы. «Надо сделать так, чтобы ложнонегативных результатов было меньше, практически исключить их», — считает он.

В обзоре, подготовленном вместе с коллегами, профессор Чемерис рассматривает преимущества и недостатки ПЦР-диагностики и других методов амплификации — копировании РНК бетакоронавирусов, к которым относится SARS-CoV-2. Теоретически весьма перспективен метод петлевой амплификации — LAMP, где используют сразу шесть или восемь праймеров.

«С одной стороны, повышается специфичность: только когда все праймеры отожгутся (сработают, распознав РНК коронавируса. — Прим. ред.), начнется амплификация, с другой — вирус мутирует и шансы, что реакция не пойдет, увеличиваются, поскольку какие бы участки генома ни выбрать, все равно вероятность мутаций больше в восьми участках, чем в двух или трех (при использовании гибридизационного зонда), достаточных для ПЦР», — объясняет исследователь.

Во время предшествующей эпидемии SARS возбудителя выявляли с помощью реакции NASBA (амплификации на основе секвенирования нуклеиновых кислот) и RCA (репликации по типу катящегося кольца). Геномный редактор CRISPR-Cas также пробуют применять для идентификации РНК нового коронавируса. Есть работы по полногеномному секвенированию любого генетического материала, находящегося в биоматериале. Метод очень чувствительный, но дорогой и долгий — занимает 20 часов. Так что в ближайшее время ПЦР с обратной транскрипцией останется самым массовым способом обнаружения коронавируса в организме.

Как проводится ПЦР-диагностика коронавируса?

ПЦР является прямым методом быстрой диагностики инфекционных заболеваний, позволяющим обнаружить специфичные участки для возбудителя инфекции.

Суть его заключается в следующем:

1. У пациента берут мазок со слизистой зева. До того, как будет взята проба, пациенту не рекомендуется за сутки принимать алкоголь, за 1 часа отказаться от пищи, питья, не курить.
2. В полученном материале выявляются фрагменты ДНК, аналогичные вирусу. Вирусную ДНК выделяют из представленной в лабораторию пробы, взятой у пациента. Но при заражении коронавирусом формируется РНК – одиночная цепь полинуклеидов. Ее отделяют и переходят к следующей фазе, когда РНК необходимо перевести в ДНК. Этот процесс назван обратной транскрипцией.
3. Затем полученный ДНК размножают (многократно дублируют) при помощи полимеразы (специального фермента). Количество повторений может достигать 40-45. Коронавирус обнаруживают путем обратного преобразования ДНК в РНК.

Ответы на частые вопросы

Здесь вы найдете ответы на часто задаваемые вопросы по поводу тестирования.

К тесту на сам вирус

Какие рекомендации в этом случае:

1. Не есть, не пить, не чистить зубы и не курить минимум за 2 часа до теста;
2. За полчаса не жевать жвачку и не рассасывать конфеты, не полоскать горло. Не пользоваться спреем для горла, каплями для носа и другими лекарственными средствами;
3. Если нос заложен, высморкаться перед процедурой.

Какие документы необходимы для тестирования?

Когда врач или скорая приедут на дом, необходимо предоставить специалисту паспорт и полис ОМС. Те же документы возьмите с собой в клинику, если симптомов болезни нет.

Что делать в случае положительного результата?

Если коронавирус подтвердится, о диагнозе сообщат в Роспотребнадзор. Тест повторят еще один раз, если симптомов нет. Если есть, еще два раза. Если повторный анализ будет положительным, человека поместят в карантин в зависимости от течения болезни. В легких случаях лечение будет на дому. В тяжелых – организуют госпитализацию.

При домашнем лечении нужно следить за самочувствием. При ухудшении состояния вызвать врача либо скорую (если ухудшение резкое).

Через 14 дней тест нужно сделать повторно два раза. Если два раза будет отрицательный результат, вам закроют больничный и вы сможете выйти из карантина.

Особенности ПЦР-исследования

Метод полимеразной цепной реакции, как расшифровывается ПЦР, обладает высокой чувствительностью и определяет в образцах пациента любые типы инфекций – грибы, вирусы, бактерии.

Для лабораторного исследования можно брать любую биологическую жидкость, где могут обнаруживаться чужеродные микроорганизмы: слюну, мочу, кровь. Однако чаще всего производится забор промывных вод бронхов и мазка из носоглотки, причем последняя процедура проще.

Взятые пробы обрабатываются специальным реагентом для выделения фрагментов вирусного РНК. Затем эти фрагменты многократно увеличиваются с помощью фермента полимеразы и воздействия низкочастотных токов. В итоге чужеродные молекулы становятся видимыми для тест-систем.

Благодаря высокой чувствительности методика ПЦР обеспечивает достаточно точные результаты даже при малых концентрациях вирионов – вирусных частиц – в образцах и отсутствии клинических симптомов заболевания.

ПЦР-тестирование – это качественный метод, дающий однозначный ответ на вопрос: болен человек или здоров. С его помощью нельзя определить, насколько давно произошло заражение, сколько вируса в организме, и на какой стадии находится болезнь. Для этого есть другие способы диагностики – в частности, анализы на антитела.

Чем уникален ПЦР-тест

Коронавирус Sars-CoV-2, как и другие респираторные инфекции, попадает в человеческий организм через слизистые глаз, носовой и ротовой полости. Он прикрепляется к мембранным рецепторам клеток посредством вирусных шипов, и наиболее уязвимыми являются дыхательные пути, мочевыделительные и пищеварительные органы. На их внутренних поверхностях имеются ферменты АПФ2 и АСЕ2, с которыми и связываются вредоносные частицы.

В первые дни после проникновения коронавирус активно клонируется в эпителии, выстилающем носоглотку, поэтому обнаруживается в слюне и муконазальном секрете. Вирусоносители, сами не зная о том, распространяют инфекцию при кашле, чихании, смехе и разговоре. Причем даже при отсутствии симптомов они могут заражать окружающих.

Если пришлось контактировать с ковидным больным, рекомендуется как можно скорее промыть нос, рот и глаза хотя бы водой

Определить, что человек болеет именно Covid-19, может только ПЦР-тест, поскольку симптомы, особенно на ранних стадиях, практически не отличаются от простуды.

В крови и лимфатической жидкости коронавирус не циркулирует, поэтому материал для исследования берут из носоглотки. Точность анализа не превышает 80%, и вероятность получения неверных результатов достаточно велика.

Кроме того, на слизистых вирус долго не держится, подвергаясь атакам иммунных клеток и смываясь слюной. Следовательно, целесообразно повторять анализ несколько раз, особенно при наличии явных симптомов, а также дополнять его тестом на антитела.

Как действовать при подозрении на коронавирус?

Если вы не болеете — нет нужды обследоваться.
Если вы заболели и чувствуете обычные симптомы ОРЗ — нужно сидеть дома и лечиться привычными методами. Главная задача — не заразить окружающих

И неважно, что у вас: COVID-19 или любой другой из респираторных вирусов.
Если на фоне ОРЗ вы почувствовали одышку — чувство, что не хватает воздуха, а частота дыхания увеличилась больше нормы (для взрослого это 16–20 дыхательных движений в минуту), — это повод вызвать врача на дом. При подозрении на коронавирус вам сделают бесплатно тест на COVID-19, проведут рентгенографию легких или КТ грудной клетки

И вот в этом случае все эти анализы будут иметь огромное значение в выборе лечебной тактики, а значит повлияют на ваше здоровье в дальнейшем.

Теперь вы сможете принять взвешенное решение о необходимости самостоятельно обследоваться на коронавирус. Будьте здоровы!

МЕРЫ ДЛЯ БОРЬБЫ С ВИРУСОМ В ОН КЛИНИК

Как узнать, есть ли антитела к коронавирусу?

Для исследования у человека берется небольшое количество крови с пальца или из вены и подвергается тестированию на антитела класса G (IgG). Полученный результат оценивается и дает возможность сделать выводы о наличии или отсутствии антител к коронавирусу.

Что показывает тест на антитела к коронавирусу?

В крови человека, болеющего или переболевшего коронавирусом, обнаруживается иммуноглобулин (антитела):

• IgM – болезнь находится в острой стадии;
• IgG – человек перенес заболевание, иммунитет формируется.

В зависимости от наличия того или иного вида антител тест покажет соответствующий результат.

Результаты теста на антитела к Covid-19

Существует пять вариантов интерпретации анализа:

IgM

Тест на антитела к коронавирусу положительный или отрицательный – что это значит?

В зависимости от результата теста определяется дальнейшая тактика работы с пациентом:

Метод ИФА

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) по своему принципу довольно прост. Для определения наличия антител в крови используются микропланшеты (пластиковые пластины), покрытые вирусным белком. При попадании на такую пластину крови пациента происходит реакция, дающая возможность выявить наличие или отсутствие в ней специфических антител. Отличается максимальной точностью результата.

Метод ИФА бывает:

• качественным — ответ подразумевает наличие или отсутствие искомого вещества в образце, дает ответ болел человек или нет, как давно болел;
• количественным (полуколичественный) — позволяет не только определить болел или нет, но и дает оценку концентрации антител в крови пациента. Это позволяет выяснить, насколько сильно отвечает иммунитет на вирусное заражение, может ли человек стать донором антител.

Для анализа берется кровь из вены. Результат будет известен через 1-3 дня. Для проведения исследования требуется специальное оборудование.

Метод ИХЛА

Расшифровывается, как иммунохемилюминесцентный анализ, тестирование ИХЛА является модификацией ИФА. Он более чувствителен к специфическим антителам, точность анализа составляет 90 %. Антитела определяются иммунной реакцией антигена с антителом. Для получения результата необходимо дополнительное оборудование.

Метод ИХА

Иммунохроматографический анализ (ИХА) относят к экспресс-тестам. Результат можно оценить уже через 15 минут. Метод не требует никакого оборудования и тестирование может проводиться в любых условиях. Принцип определения аналогичен тестам на беременность: используются полоски, кассеты или панели.

Этот вид анализа основан на разделении частиц методом парной связки и реакции между антителом в биоматериале пациента и антигеном. Берется кровь из пальца.

Экспресс-тесты на антитела методом ИХА — проводится по принципу глюкометра. По капле крови можно определить имеется или нет в крови специфический белок. Чтобы определить количество или скорость увеличения концентрации, потребуется проведение дополнительных исследований.

Результат качественный: есть или нет антитела IgM и IgG.

Подробнее

Анализ крови на антитела к короновирусу SARS-CoV-2 (COVID-19)

Когда делают исследование по методу ПЦР?

Метод определения иммуноглобулинов

Компания «Яндекс»

Заказать тестирование на дому через сервис компании Яндекс «Помощь рядом» можно на сайте благотворительной организации https://help.yandex.ru/request/. После оформления запроса к пациенту приезжает специалист одной из лабораторий-партнеров Яндекс (ДНК-технологии», «Генериум», «Литех», «ЦСП» и EMG). При подаче заявки пациент указывает паспортные данные, анонимный анализ исключен.

По приезду медицинский эксперт берет мазок из зева (при необходимости и из носа), довозит его до лаборатории. По прошествии 3 дней с момента забора биоматериала на электронную почту приходит результат. Тестирование на коронавирус через проект «Помощь рядом» бесплатный.

Достоинства и недостатки метода

Бесконтактный тест на коронавирус

Чтобы избежать любых контактов, можно заказать домой набор для бесконтактного тестирования на COVID-19. Курьер привезет сам набор и подробную инструкцию, подождет за пределами квартиры или дома, пока вы сделаете тест, и сразу же заберет у вас конверт с биоматериалом. Результаты придут на электронную почту.

Плюсы: полное отсутствие внешних контактов с другими людьми, умеренная цена (от 1900 руб.).

Минусы: повышается вероятность ложноотрицательных результатов из-за неправильного сбора биоматериала. Незнание техники забора соскоба из носоглотки может привести к тому, что в образце не окажется инфекционного агента. Тест придет ложноотрицательным.

Клиники, осуществляющие доставку наборов для бесконтактного самостоятельного тестирования на дому:

• CMD. Цена 1900 руб. Готовность до 6 дней.
• «Хеликс». Цена 1900 руб. Стоимость доставки в регионах рассчитывается при оформлении заказа. Готовность 2 дня.
• DocDoc х Сбербанк x «СитиЛаб». Цена 2490 руб. Готовность 2 суток.
• Labquest. Цена 4000 руб. Готовность 3 дня.

Все частные лаборатории, которые проводят тестирование на коронавирус, обязаны сообщать в Роспотребнадзор о выявленных случаях заражения. Первично положительные анализы в течение двух часов передаются в ведомственную референс-лабораторию, которая должна подтвердить диагноз. Он считается подтвержденным только после повторного анализа биоматериала в Роспотребнадзоре.

Если у вас есть симптомы ОРВИ, был подтвержденный контакт или вы вернулись из-за границы в течение последних 14 дней, вы можете сделать тест только в городских службах. Обратитесь на горячую линию по коронавирусу 8 (800) 555-49-43 или вызовите врача скорой помощи.

Советы, как не ошибиться с выводами

Совет №1

Если вы вспомнили, что болели простудой/ОРЗ/бронхитом, к примеру, в феврале, то к осени антител к коронавирусу в крови уже точно не будет. Глобулины типа G «живут» не больше 3-4 месяцев, по разным оценкам специалистов.

Совет №2

Если антитела обнаружились, но болезнь протекала легко или бессимптомно, расслабляться нельзя. При таких формах Covid-19 lgG вырабатывается мало, поэтому шансы заразиться повторно очень высоки.

Чем тяжелее протекает инфекция, тем больше глобулинов образуется, и они дольше циркулируют в крови после выздоровления. Как только иммунная система побеждает в борьбе с вирусом, синтез антител прекращается.

Для противодействия каждому виду патогена вырабатываются соответствующие белки-антитела

Однако существует теория, что сохраняются так называемые «клетки памяти», которые запоминают, какие и сколько требуется антител при попадании конкретного патогена. Если в дальнейшем данная инфекция проникает в организм, иммунитет вырабатывает иммуноглобулины не за 3-4 недели, а в 3 дня. Более того, антитела-дублеры способны «смягчать» тяжесть болезни и препятствовать развитию осложнений.