Правила проведения экспресс теста на ковид

Серологические тесты — на антитела

Серологические тесты определяют наличие в крови пациента антител — иммуноглобулинов, выработанных в ответ на инфекцию. Насчитывается пять классов иммуноглобулинов. Из них три класса, IgM, IgG и IgА являются основными в иммунной защите организма.

Антитела – это сложные белки с несколькими функциями. Они способны не только распознавать специфические патогены, но и активировать защитные механизмы организма, позволяющие нейтрализовать и уничтожить вирусы и бактерии. Антитела – часть приобретенного иммунитета, поэтому их наличие в крови сигнализирует о встрече с определенным патогеном и подтверждает прошлую инфекцию.

При бактериальной инфекции развитие специфического иммунного ответа достаточно предсказуемо. Первыми на инфекцию реагируют клетки неспецифического иммунитета – нейтрофилы, макрофаги и моноциты. Их задача – найти и обезвредить врага, что они могут сделать и без наводки антител.

На антиген-тесты возлагают надежды

«Мы считаем, что у тестов на антиген самый высокий потенциал для скрининга бессимптомных людей», — считает Мара Аспинолл (Mara Aspinall), создатель программы биомедицинской диагностики в Университете штата Аризона. Она сообщила JAMA, что сейчас два десятка компаний работают над простым и быстрым тестом на SARS-CoV-2, который по простоте можно будет сравнить с тестом на беременность.

«Мы берем современную лабораторию и сжимаем ее до размера покрытой пластиком полоски», — сказал JAMA Бобби Брук (Bobby Brooke) основатель E25Bio, одной из компаний, которые принимают участие в гонке за простым тестом.

Письмо Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения от 20 мая 2020 г. № 01и-945/20 “О применении экспресс-тестов на выявление антител к COVID-19”

27 мая 2020

Федералъная служба по надзору в сфере здравоохранения в связи с выявлением в сети Интернет информации и статей, касающихся экспресс-тестов, выявляющих антитела к новой коронавирусной инфекции COVID-19 (SARS-CoV-2), информирует о следующем:

1. Результаты тестирования на антитела не должны использоваться в качестве единственного основания, подтверждающего наличие SARS-CoV-2 или для информирования о статусе инфекции. В случае, если результаты тестирования отрицательные, а клинические симптомы сохраняются, необходимо провести дополнительное повторное тестирование с использованием других методов. Отрицательный результат не исключает возможности заражения COVID-19.

2. Положительные результаты могут быть связаны как с текущим штаммом коронавируса, так и с другими ранее выявленными типами коронавируса, такими как HKUl, NL63, OC43, 229E.

3. Экспресс-тесты являются скрининговыми и не рекомендованы для лабораторной диагностики COVID-19. Как и во всех диагностических тестах, полученные результаты должны рассматриваться вместе с другой клинической информацией, доступной врачу.

4. Экспресс-тесты предназначены только для диагностики in vitro и не применимы в бытовых (домашних) условиях. Экспресс-тесты следует использовать для выявления антител IgG и IgM к COVID-19 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы. Ни количественное значение, ни скорость увеличения концентрации антител IgG или IgM к COVID-19 с помощью экспресс-тестов не определяются.

Также сообщаем о следующих особенностях применения экспресс-тестов в соответствии с рекомендациями производителей:

— экспресс-тесты рекомендуется использовать не ранее 3-го дня после появления клинических симптомов заболевания;

— у пациентов, не имеющих клинических симптомов заболевания, рекомендуется проведение дополнительных клинических и лабораторных исследований;

— при использовании экспресс-тестов необходимо строго придерживаться инструкции по применению.

Сроки анализа на коронавирус Covid-19

В связи с ажиотажным спросом на тестирование результаты анализов могут приходить с задержкой. Если тест делается в платной лаборатории, то его результат можно получить по электронной почте.

• Чистое время, которое затрачивается на анализ составляет:
• РНК-скрин методом петлевой изотермальной амплификации (LAMP) делается примерно от 15 минут до часа
• ИФА тесты показывают наличие антител к коронавирусу примерно за 2 часа
• Тесты ПЦР занимают от 2 часов до 2 дней

Положительный тест на SARS-CoV-2 обычно подтверждает диагноз COVID-19, хотя возможны ложноположительные результаты тестов – это когда результат показывает, что вирус есть, но на самом деле его нет. Также зафиксированы и ложноотрицательные результаты тестов – когда вирус есть, но он не обнаружен тестом.

К вышеобозначенному времени нужно прибавить время на доставку анализов в лаборатории, подготовительные работы, заведение результата теста в электронную систему, рассылку на электронную почту клиентов.

Сколько живет коронавирус

В то же время исследователи пытаются ответить на другой важный вопрос о COVID-19: сколько времени SARS-CoV-2 может находиться в организме человека, прежде чем он станет безопасным для других? С точки зрения борьбы с пандемией, способность человека передавать вирус другому человеку помогает определить, нужно ли ему самоизолироваться. Общепринятые «14 дней» зачастую не работают — некоторые заражают других и через месяц.

В любом случае этот тест заметно облегчит жизнь в пандемию коронавируса. Его стоимость и скорость позволяют легко тестировать большие группы, и даже ежедневное тестирование людей, которые контактировали с инфицированным человеком, играет большую роль. Например, так можно периодически тестировать детей в школе.

Возможно, именно этот тест поможет быстро выявить случаи COVID-19 в реальном мире и позволит лучше понять сам вирус. Либо же нашим спасением станет вакцина от коронавируса. Но где гарантии, что ее сделают все?

Откуда берутся ложные результаты ПЦР на ковид

С весны 2020 года в СМИ и интернете муссируется тема немалого количества ложноотрицательных и ложноположительных результатов тестов на ковид. По словам главного внештатного пульмонолога Минздрава России Сергея Авдеева, которые цитирует РБК, до 30-40% тестов ПЦР могут давать ложные результаты. Так называют отрицательный результат ПЦР при наличии у пациента выраженных симптомов COVID-19 и изменений на КТ. Или наоборот — человек болеет ОРВИ, а тест показывает, что он заражен коронавирусом.

При этом с 13 ноября 2020 года Роспотребназдор отменил обязательную сдачу теста на COVID-19 у тех людей, которые контактировали с зараженным. Они могут покинуть 14-дневную самоизоляцию без проведения теста. Это довольно сильно напугало многих людей, которые опасаются заболеть коронавирусом при случайном контакте с прохожими, покупателями в магазинах и т.д. Так что вопрос ложных результатов ПЦР остается по-прежнему острым.

Одной из причин ложноотрицательных и ложноположительных результатов стала низкая чувствительность некоторых тестов, которые использовались весной, когда спешно разрабатывались методики быстрого выявления коронавирусной инфекции. Сейчас тесты стали более чувствительными, однако есть и другие причины недостоверных результатов.

Дело в том, что РНК COVID-19 довольно нестойкая и быстро разрушается под воздействием внешней среды. А потому точность анализа очень сильно зависит от правильного взятия, хранения и перевозки биоматериала, его достаточного количества. Если нарушать правила забора мазков или взять недостаточно материала для исследования, то ПЦР может дать ложный результат.

Наконец, ПЦР на более поздних стадиях болезни тоже может выдать отрицательный результат, т.к. вирус уже погиб под влияем лекарств или скрылся, а воспалительный процесс тем не менее идет.

Виды тестов

Ниже приведены все существующие тесты на коронавирус в 2020 году.

Тесты при подозрении на коронавирусную инфекцию

На данный момент тестирование на коронавирусную болезнь происходит следующими способами:

• ПЦР (полимеразная цепная реакция) с обратной транскрипцией для обнаружения нуклеиновых кислот (РНК)
• Серологические тесты – иммуноферментный анализ (ИФА), иммуно-хроматографический анализ (ИХА), хемилюминесцентный иммуноанализ
• Метод петлевой изотермальной амплификации нуклеиновых кислот (РНК) (LAMP)

Точность и прогнозные значения тестирования на SARS-CoV-2 систематически не оценивались, и чувствительность , вероятно, зависит от точности данных, а также от качества полученного образца биологического материала.

Нестандартные тесты

Компьютерная томография (КТ) грудной клетки – при подозрении на пневмонию. КТ грудной клетки помогает поставить диагноз, но никаких признаков, позволяющих надежно исключить или подтвердить диагноз COVID-19, нет.

У пациентов с COVID-19 наблюдались следующие отклонения лабораторных показателей:

1. Общий анализ крови: нормальный уровень лейкоцитов, лейкопения, лимфопения (80% +), тромбоцитопения.
2. Биохимический анализ крови: повышенный индекс отношения азота мочевины к креатинину, повышенный уровень АСТ, АЛТ и общего билирубина.
3. Маркеры воспаления: нормальный или низкий уровень прокальцитонина, высокий уровень C-реактивного белка и ферритина. 4) Другое: повышенный D-димер, интерлейкин-6 и лактатдегидрогеназа.

Тесты ОТ-ПЦР (RT-PCR) на Covid 19

К числу наиболее популярных в мире исследований, позволяющих определить наличие вируса в организме, относится тест с полимеразной цепной реакцией. Родоначальником методики является американский специалист в области биохимии — Кэри Муллис.

В ходе данной проверки осуществляется забор мазка из горла или носа пациента. Полученный материал позволяет выявить наличие патогенной макромолекулы РНК в живых клетках.

Как известно, в составе любого вируса содержится РНК. В рамках вышеуказанного тестирования данная макромолекула подвергается обработке химическими веществами, позволяющими удалить ненужные компоненты и извлечь из образца исключительно РНК. Также в ходе тестирования проводится термоциклирование, основанное на снижении и повышении температуры состава.

Кроме того, специалисты применяют метод ПЦР с целью усиления сегментов вирусного кода, выявленных в биологическом материале человека. Это значительно упрощает процесс обнаружения коронавирусной инфекции.

Почему ПЦР-тест пока не спас мир

В настоящее время ПЦР-тесты остаются самыми чувствительными к коронавирусу. В Южной Корее и Новой Зеландии их широкое применение помогло подавить инфекцию, указывает автор публикации в Nature. Однако этот успех не удалось повторить в других странах. Согласно той же статье, в США не удалось добиться их эффективного использования из-за плохой координации, партий некачественных тестов и сложностей с поставками.

Оперативность ПЦР-теста невелика, в лучшем случае он займет несколько часов, в реальной жизни в случае плохого сценария результаты можно ожидать несколько дней. Гипотетически, человек, у которого реакция ПЦР не обнаружила коронавирус, может быть уже инфицированным на момент получения результата анализа. Проведение анализа требует специальной лаборатории и обученных специалистов, то есть, он ресурсоёмкий.

Затрудняет массовое тестирование и сравнительно высокая цена теста. В Москве его проведение на дому может стоить более 5000 рублей.

Кого тестируют в первую очередь?

На данный момент существуют следующие приоритеты на тестирование Covid-19:

Приоритет 1

Обеспечивает оптимальные варианты лечения для всех госпитализированных пациентов, снижает риск инфекций, связанных со здравоохранением, и поддерживает целостность системы здравоохранения.

В первую очередь тестируются:

• Госпитализированные пациенты
• Работники медицинского учреждения с симптомами

Приоритет 2

Гарантирует, что люди с высоким риском осложнений инфекции быстро идентифицируются и соответствующим образом сортируются.

• Пациенты в учреждениях длительного ухода (дома престарелых и т.п.) с симптомами
• Пациенты 65 лет и старше с симптомами
• Обычные пациенты с симптомами

Приоритет 3

Если позволяют ресурсы, проверяются люди, которые сейчас работают.

• Работники с симптомами, которые обеспечивают работоспособность общественной инфраструктуры
• Лица, которые не соответствуют ни одной из вышеуказанных категорий с симптомами
• Работники учреждений здравоохранения и лица, оказывающие первую помощь, в том числе волонтеры
• Люди с легкими симптомами в сообществах, испытывающих большое количество госпитализаций с COVID-19

Неприоритетные

Лица без симптомов

Спасут ли мир тесты на антиген

Тесты, которые обнаруживают антигены коронавируса (белки на его поверхности), существенно оперативнее: результат можно получить в течение 5-15 минут. Для их проведения берут мазок из носа или с задней стенки глотки.

Чувствительность и специфичность

Тесты на антиген высокой специфичностью: согласно американским Центрам по контролю и профилактике заболеваний (CDC), она стремится к 100%. Это значит, что к положительным результатам этого теста можно относиться с доверием, ложноположительные результаты редки. Но его чувствительность колеблется от 84% до 97,6%, то есть, ниже, чем у ПЦР-теста. Чем ниже чувствительность, тем выше риск ложноотрицательного результата. Американское Управление по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами (FDA) рекомендует проверять отрицательные результаты антиген-тестов у людей с симптомами COVID-19 при помощи ПЦР-теста.

Экспресс-тесты на антиген недавно получили плохую прессу. Wall Street Journal в заголовке статьи связал их со вспышкой COVID-19 после приема в Розовом Саду Белого дома. Одним из заболевших оказался президент США Дональд Трамп. Сообщалось, что участники проходили экспресс-анализ при помощи тест-системы BinaxNOW компании Abbot непосредственно перед мероприятием.

У антиген-тестов есть несомненные достоинства. Для них не требуется специальной лаборатории, они дешевле, чем ПЦР. Их можно использовать непосредственно у постели большого (например, в приемном отделении или дома). Потенциально их можно применять в учебных учреждениях и на различных мероприятиях.

Антиген-тест – еще не «тест мечты»

Высокий риск ложноотрицательного результата и необходимость проверки – не все недостатки антиген-теста. Есть и другие причины, по которым существующие тестовые платформы не подходят на роль «народного» теста, который можно быстро провести дома перед выходом на работу.

• Имеющиеся антиген-тесты – не для самостоятельного использования. Для их проведения все равно нужен медработник.
• Они недостаточно дешевые для частого применения. Тестовый набор Abbott стоит 5 долларов, Quidel – 23 доллара. Тестовая платформа компании Beckton Dickinson требует специальный анализатор, который стоит 250-300 долларов. В Москве проведение теста в лаборатории может обойтись примерно в 3 тысячи рублей.
• Неизвестна надежность существующих антиген-тестов при бессимптомном течении COVID-19. В последнем обзоре Кокрейновского содружества такие данные полностью отсутствуют. В настоящее время FDA рекомендует проводить антиген-тесты только людям с симптомами. Например, «прославленный» тест производства Abbott предназначен для использования в течение первой недели болезни.

JAMA приводит пример неудачи использования антиген-теста в домах престарелых в Неваде. Половина положительных тестов, перепроверенных при помощи ПЦР, оказались ложно положительными.

От аптечных сайтов до маркетплейсов

Что собой представляют данные медицинские изделия и почему их нельзя относить к «тестам на коронавирус», как это преподносят клиентам аптечные сети? Мы изучили рынок и обратились к специалистам.

Экспресс-тесты на антитела к коронавирусу можно найти на сайтах российских аптек и сервисов поиска лекарств. Предложений — масса. К примеру, федеральная справочная служба «ПоискЛекарств» предлагает купить «Набор для обнаружения антител к коронавирусу (sars-cov-2) №25» от корейской Humasis Co., Ltd. В свою очередь, ресурс «АптекаМос» разместил информацию о продаже «Набора реагентов SARS-CoV-2 Antibody Test для выявления антител IgM/IgG к коронавирусу (20 тестов)», производителем которого является китайская компания Lepu Medical Technology (Beijing) Co. Ltd. Аналогичный набор можно найти на сайте сети аптек «ЕАптека». При этом везде указано, что товара пока нет в наличии.

Тесты на антитела также можно найти на различных маркетплейсах, причем выбор там «побогаче» — помимо китайских и корейских наборов встречаются даже российские. К примеру, «Комус» продает тесты производства «Сколково» — 19 тыс. рублей за 20 штук, и, на удивление, товар есть в наличии.

Виды тестов на коронавирус

В настоящий момент популярностью пользуются два варианта тестов. Первоначально актуальность имели исследования на основе ПЦР, позволяющие выявить заболевание в активной стадии. При помощи данного способа можно было выявить носителей инфекции, у которых не наблюдалось каких-либо признаков недуга.

В ходе проведения теста ПЦР на коронавирус у предполагаемого больного берется мазок из носоглотки, на основе которого удается установить факт выделения патогенной микрофлоры в окружающую среду. Идентификация полученного материала на его отношение к коронавирусным инфекциям производится в лабораторных условиях.

Несмотря на повышенную чувствительность данного вида исследования, ошибки, связанные с получением ложноотрицательного и ложноположительного результата, все же случаются. Это обусловлено незначительным выделением болезнетворных микроорганизмов или длительным периодом времени после попадания вирус в организм.