Эпидемиолог рассказал, как расшифровать экспресс-тест на антитела к covid-19

Почему ПЦР-тест пока не спас мир

В настоящее время ПЦР-тесты остаются самыми чувствительными к коронавирусу. В Южной Корее и Новой Зеландии их широкое применение помогло подавить инфекцию, указывает автор публикации в Nature. Однако этот успех не удалось повторить в других странах. Согласно той же статье, в США не удалось добиться их эффективного использования из-за плохой координации, партий некачественных тестов и сложностей с поставками.

Оперативность ПЦР-теста невелика, в лучшем случае он займет несколько часов, в реальной жизни в случае плохого сценария результаты можно ожидать несколько дней. Гипотетически, человек, у которого реакция ПЦР не обнаружила коронавирус, может быть уже инфицированным на момент получения результата анализа. Проведение анализа требует специальной лаборатории и обученных специалистов, то есть, он ресурсоёмкий.

Затрудняет массовое тестирование и сравнительно высокая цена теста. В Москве его проведение на дому может стоить более 5000 рублей.

Частые вопросы

Бывают ли ложноположительные результаты, и чем они вызваны? В редких случаях возможен технический сбой, когда тест-система «видит» антитела, а на самом деле их нет. Еще одной причиной может быть недостаточный уровень глобулинов, который не распознается прибором.

Если при положительных антителах ПЦР-тест будет отрицательным, то инфекции в организме нет

Формированию иммунитета иногда препятствует выработка дефектных глобулинов, которые не способны справиться с вирусом. И это один из факторов, приводящих к рецидиву заболевания.

Так для чего же нужно тестирование, если результаты не гарантируют иммунитета и не всегда говорят о болезни?

Несмотря на непредсказуемость создания иммунной защиты, сдача анализов на антитела все-таки очень важна, прежде всего, для медицинского персонала. Осведомленность о переболевших врачах и медсестрах поможет лучше распределить риски, так как, вероятнее всего, они обладают иммунитетом

Хотя по понятным причинам меры предосторожности это не отменяет. Тест нужен всем тем, кто не может в силу особенностей профессии оставаться дома и работать удаленно – продавцам, водителям транспорта, коммунальщикам и др

Причина та же, что и в предыдущем случае. Выявление антител позволяет оценить долю переболевших коронавирусом в отдельно взятом регионе. Для этого необязательно проверять всех подряд, достаточно выборки из нескольких тысяч человек. Размер данной выборки зависит от желаемой точности. Еще одной целью тестирования является определение процента людей, у которых Covid-19 протекает бессимптомно. Такой параметр представляет большую ценность, и на сегодняшний день о нем мало что известно. Количественные тесты делают с целью найти переболевших людей, способных стать донорами плазмы. Несмотря на пока не доказанную эффективность этого метода, есть основания считать его весьма перспективным. Анализы на уровень иммуноглобулинов нужны для проверки эффективности создаваемых вакцин. Они полезны для мониторинга иммунного ответа на инфекцию и наблюдений за динамикой развития тяжелых форм Covid-19 – как быстро, и какие появляются антитела. Нередко ПЦР-тесты ошибаются и выдают ложноотрицательные результаты при наличии подозрительных симптомов. Тогда на помощь приходят антитела, по количеству которых можно поставить окончательный диагноз, подтвердив или опровергнув Ковид. Особенно часто такое случается на поздних стадиях инфекции.

Список не полный, но он дает представление о том, насколько оправдано проведение тестирования на антитела.

Виды и нормы антител у человека?

У кого есть антитела, блокирующие коронавирус?

По наблюдениям ученых, стойкий иммунитет формируется только у 8% переболевших, у остальных он довольно слабый. У некоторых количество антител значительно уменьшается в течение первого месяца после болезни. Такие люди могут заразиться повторно.

Спасут ли мир тесты на антиген

Тесты, которые обнаруживают антигены коронавируса (белки на его поверхности), существенно оперативнее: результат можно получить в течение 5-15 минут. Для их проведения берут мазок из носа или с задней стенки глотки.

Чувствительность и специфичность

Тесты на антиген высокой специфичностью: согласно американским Центрам по контролю и профилактике заболеваний (CDC), она стремится к 100%. Это значит, что к положительным результатам этого теста можно относиться с доверием, ложноположительные результаты редки. Но его чувствительность колеблется от 84% до 97,6%, то есть, ниже, чем у ПЦР-теста. Чем ниже чувствительность, тем выше риск ложноотрицательного результата. Американское Управление по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами (FDA) рекомендует проверять отрицательные результаты антиген-тестов у людей с симптомами COVID-19 при помощи ПЦР-теста.

Экспресс-тесты на антиген недавно получили плохую прессу. Wall Street Journal в заголовке статьи связал их со вспышкой COVID-19 после приема в Розовом Саду Белого дома. Одним из заболевших оказался президент США Дональд Трамп. Сообщалось, что участники проходили экспресс-анализ при помощи тест-системы BinaxNOW компании Abbot непосредственно перед мероприятием.

У антиген-тестов есть несомненные достоинства. Для них не требуется специальной лаборатории, они дешевле, чем ПЦР. Их можно использовать непосредственно у постели большого (например, в приемном отделении или дома). Потенциально их можно применять в учебных учреждениях и на различных мероприятиях.

Антиген-тест – еще не «тест мечты»

Высокий риск ложноотрицательного результата и необходимость проверки – не все недостатки антиген-теста. Есть и другие причины, по которым существующие тестовые платформы не подходят на роль «народного» теста, который можно быстро провести дома перед выходом на работу.

• Имеющиеся антиген-тесты – не для самостоятельного использования. Для их проведения все равно нужен медработник.
• Они недостаточно дешевые для частого применения. Тестовый набор Abbott стоит 5 долларов, Quidel – 23 доллара. Тестовая платформа компании Beckton Dickinson требует специальный анализатор, который стоит 250-300 долларов. В Москве проведение теста в лаборатории может обойтись примерно в 3 тысячи рублей.
• Неизвестна надежность существующих антиген-тестов при бессимптомном течении COVID-19. В последнем обзоре Кокрейновского содружества такие данные полностью отсутствуют. В настоящее время FDA рекомендует проводить антиген-тесты только людям с симптомами. Например, «прославленный» тест производства Abbott предназначен для использования в течение первой недели болезни.

JAMA приводит пример неудачи использования антиген-теста в домах престарелых в Неваде. Половина положительных тестов, перепроверенных при помощи ПЦР, оказались ложно положительными.

Сколько живет коронавирус

В то же время исследователи пытаются ответить на другой важный вопрос о COVID-19: сколько времени SARS-CoV-2 может находиться в организме человека, прежде чем он станет безопасным для других? С точки зрения борьбы с пандемией, способность человека передавать вирус другому человеку помогает определить, нужно ли ему самоизолироваться. Общепринятые «14 дней» зачастую не работают — некоторые заражают других и через месяц.

В любом случае этот тест заметно облегчит жизнь в пандемию коронавируса. Его стоимость и скорость позволяют легко тестировать большие группы, и даже ежедневное тестирование людей, которые контактировали с инфицированным человеком, играет большую роль. Например, так можно периодически тестировать детей в школе.

Возможно, именно этот тест поможет быстро выявить случаи COVID-19 в реальном мире и позволит лучше понять сам вирус. Либо же нашим спасением станет вакцина от коронавируса. Но где гарантии, что ее сделают все?

Расшифровка результатов

Для определения иммуноглобулинов к коронавирусу применяются специально разработанные тест-системы на антитела к COVID-19. При расшифровке результата анализа нужно ориентироваться на установленные для той или иной тест-системы референсные значения иммуноглобулинов. Референсные значения – это диапазон нормальных результатов анализов; его получают путем усреднения результатов при массовом тестировании здоровых людей. Поскольку лаборатории пользуются различными тест-системами, то и референсные значения могут отличаться. В частности, на сайте Мосгорздрава указаны такие референтные значения при COVID-19: для антител IqG – 10.0, для IqM – 2.0. В результатах анализа ИФА рядом с числами могут стоять буквы КП, что расшифровывается как коэффициент позитивности.

Результаты ИФА-тестирования могут быть такими:

Сравнив полученный результат анализа на антитела и показатели из данной таблицы, можно сделать предварительный вывод о наличии или отсутствии заболевания. Например, показатели IgM 1.23 и IgG 132.12 говорят о том, что человек уже переболел COVID и у него выработался иммунитет. А показатель IgM 5.57 и IgG: 8.92 значит, что это острая стадия заболевания.

Но самостоятельно расшифровывать полученные результаты небезопасно: ИФА-тест не может использоваться для окончательной постановки диагноза: он является вспомогательным способом диагностики. Кроме того, у используемых лабораториями тест-систем разная чувствительность, соответственно, могут отличаться и референсные значения IgG и IgM. Поэтому интерпретация результатов теста на антитела к COVID-19 должна осуществляться врачом на основе клинических проявлений заболевания, результатов других исследований (анализ ПЦР, КТ легких и т.д.) с учетом эпидемиологической ситуации.

ИФА-тест определяет титр антител в крови и позволяет узнать, переболел ли человек COVID-19.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Современные методы позволяют точно подобрать набор веществ, нужных для реакции, а значит, «достроить» именно ДНК SARS-Cov-2, а не другого похожего.

Теперь о недостатках. Первое — относительно высокая цена. Она обусловлена высокой себестоимостью как праймеров, так и оборудования – амплификаторов. Второе — время. Ждать, пока размножится ДНК, нужно несколько часов, а с учетом транспортировки до лаборатории результаты теста пациент может узнать через сутки и более.

Также эффективность теста не превышает 80%. Праймеры для реакции подбираются на основе информации об РНК вируса. Но фрагмент с теми же «буквами» может оказаться и в других микроорганизмах пробы – отсюда ложноположительный результат. Ложноотрицательный результат получится, если вирусные частицы ушли из ротоглотки, спустились дальше по дыхательному пути. Тогда в пробе просто не окажется РНК вируса.

Сдавать тест ПЦР есть смысл в том случае, если человек контактировал с пациентом с подтвержденным коронавирусом.

Всегда ли ошибаются тесты

Следует понимать, что сомнительный тест далеко не всегда бывает ошибочным. Вполне возможно, что результаты повторных обследований будут идентичными. Но в любом случае медики, сотрудники лабораторий пытаются разобраться, почему первые данные вызвали сомнения. Одна из причин — малоизученность коронавирусной инфекции. Структура ее возбудителя необычна, объясняет легкость проникновения в дыхательные пути, ускоренную репликацию, быстрое распространение по дыхательной системе.

Это интересно: У коронавирусов на поверхности есть шипы, с помощью которых они «обманывают» клеточные рецепторы и проникают внутрь, начиная размножаться.

Пока еще окончательно не изучен механизм развития инфекции. Это означает, что тесты будут постепенно совершенствоваться, а их чувствительность — повышаться. Самостоятельно определить информативность лабораторной диагностики невозможно. Это прерогатива врача. Он сопоставляет полученные данные с клинической картиной, эффективностью проводимого лечения, наличием инфицированных родственников.

Первый этап

Инкубационный период коронавирусной инфекции — время с момента внедрения патогенов в организм до появления выраженных симптомов. Длится он у взрослого человека с хорошим состоянием здоровья — от одной до двух недель. Его продолжительность составляет от 1 до 3 дней при наличии хронических заболеваний, а также у зараженных людей пожилого и старческого возраста. В медицинской литературе описаны случаи позднего появления симптомов на фоне приема иммуномодуляторов и противовирусных лекарств.

Тест ИФА на коронавирус вызывает сомнения, если он выполнен во время инкубационного периода

Пока признаков опасной патологии нет, врачи не рекомендуют выполнять тестирование, так как его результат может быть сомнительным. С коронавирусами борются интерфероны, часто с большим успехом. Если ими были уничтожены патогены, то антитела иммунной системой не вырабатывались. Так что, результат тестирования будет сомнительным.

Второй этап

Может ли быть сомнительным тест на второй стадии развития инфекции? Это реально при обследовании методом и иммуноферментного анализа, и ПЦР. Первые симптомы проявились, поэтому человек самостоятельно или по назначению врача принимает противовирусные средства, оставляя иммунную систему без работы. Антитела начнут вырабатываться только на заключительном этапе второй стадии.

Третий этап

Почему даже при выраженных признаках болезни ошибаются тесты? На третьей стадии коронавирусов в организме немного. Они покинули его по большей части, но оставили после себя мощный инфекционно-воспалительный процесс в бронхолегочной системе. Медики используют выражение «цитокиновый шторм». Вырабатывается огромное количество медиаторов воспаления, что приводит к повреждению собственных тканей организма. Это может исказить результаты лабораторного тестирования.

Положительный анализ без наличия симптомов

Результат анализа на коронавирус сотрудники лабораторий сообщают по телефону, в виде СМС- сообщения или письма на электронную почту.

При нормальном самочувствии положительный результат ПЦР-диагностики указывает на то, что болезнь только начинается или носит бессимптомную форму.

Самоизоляция в течение 14 дней при положительном ПЦР-тесте необходима независимо от наличия или отсутствия симптоматики. Это требование медиков связано с тем, что зараженный является распространителем инфекции.

Нельзя самостоятельно принимать решение о дальнейших действиях, а также не стоит пытаться скрыть результат положительного теста на коронавирус. Все лаборатории, в которых проводится исследование, получили аккредитацию Минздрава и Роспотребнадзора, поэтому обязаны сообщать обо всех выявленных случаях инфекции.

Всем бессимптомным зараженным необходимо пройти повторное обследование. После первичноположительного теста на коронавирус тестирование должны пройти все, кто контактировал с зараженным — его родственники, коллеги. Им необходимо стать тест и пройти самоизоляцию. При  изменении состояния здоровья необходимо обратиться в поликлинику по месту жительства и оповестить медиков.

Дорогой читатель, мы собрали всю самую важную и актуальную информацию о COVID-19 на 1 странице — главное о коронавирусе.Также, доступна актуальная статистика по: России, Москве, Подмосковью и городам, СпБ и всем регионам РФ и странам мира.

Причины

На конгрессе под названием «Человек и лекарство», который проходил в апреле 2020 г., главный внештатный пульмонолог Министерства здравоохранения С. Авдеев заявил:

– Точность имеющихся ПЦР-систем для диагностики Covid-19 составляет 70-80%. Такая оценка была дана им на основании исследований с участием 1400 человек. – Следовательно, у остальных 20% результат может быть ложноположительным или ложноотрицательным.

Министр здравоохранения России М. Мурашко в своем интервью телеканалу «Россия-1» сказал, что врачи могут ставить предварительный диагноз «коронавирус» до подтверждения его результатами анализов:

– Диагноз выставляется без лабораторных доказательств, по клиническим симптомам. Это нормальная практика для врачей, – отметил министр.

Даже при позитивном результате ПЦР человек может быть здоров сам, если болезнь протекает бессимптомно, и почти не представлять угрозы для окружающих. Однако определенная степень риска передачи инфекции все же остается, поэтому ВОЗ и Минздрав РФ рекомендуют таким гражданам соблюдать карантин и использовать защитные средства ради безопасности других.

Важность ориентации на наличие симптоматики подчеркивает главный фтизиатр России И. Васильева:. – Примерно 80% случаев Covid-19 протекают в легкой форме, без серьезных осложнений

Ехать в стационар при слабовыраженных признаках смысла никакого нет. Более того, если уровень насыщения крови кислородом больше 96%, то даже при истинноположительном тесте и наличии изменений на КТ пациенту лучше остаться дома. Исключение составляют случаи, когда есть дополнительные показания для госпитализации – в частности, хронические патологии, – разъясняет фтизиатр

– Примерно 80% случаев Covid-19 протекают в легкой форме, без серьезных осложнений. Ехать в стационар при слабовыраженных признаках смысла никакого нет. Более того, если уровень насыщения крови кислородом больше 96%, то даже при истинноположительном тесте и наличии изменений на КТ пациенту лучше остаться дома. Исключение составляют случаи, когда есть дополнительные показания для госпитализации – в частности, хронические патологии, – разъясняет фтизиатр.

Ответы на частые вопросы

Какой титр антител к коронавирусу считается высоким? Четкие количественные критерии для систем тестирования на антитела к коронавирусной инфекции пока не выработаны. На данном этапе во всем мире осуществляется сбор и накопление сведений о новом коронавирусе, в том числе данных о его лабораторной диагностике методом ИФА. Поэтому невозможно сказать, какой именно титр антител к нему может считаться достоверно высоким. По словам Ивана Скороходова, члена ассоциации аллергологов и иммунологов России, человек, переболевший коронавирусом, может стать донором плазмы для тяжелых больных, если показатели IgG у него будут достаточно высокими

Для этого важно проконтролировать условия: титр IgG должен быть больше 40, а IgM больше или равно 1,5, или же титр IgG больше 80, а IgM больше или равен нулю

Какой титр антител указывает на то, что у человека сформировался иммунитет к коронавирусу? Чтобы сформировался иммунитет к COVID-19, показатель иммуноглобулинов IgG должен быть больше 10. Но даже если по результатам анализа обнаружены иммуноглобулины IgG в таком количестве, нельзя утверждать, что человек будет обладать стойким иммунитетом к COVID.

Максимальный уровень иммуноглобулинов класса G наблюдается спустя два-три месяца после заражения. Но клинические исследования показали, что у большинства людей, заразившихся коронавирусом, защитный титр антител существенно снижается уже через три месяца после перенесенного заболевания. А у тех, кто страдает сахарным диабетом, ожирением, аллергическими и аутоиммунными заболеваниями, титр иммуноглобулинов G начинает снижаться еще раньше – через два месяца после перенесенного заболевания. В частности, по данным ученых из Королевского колледжа Лондона, антитела к коронавирусу сохранились лишь у 17% переболевших им. Можно лишь предположить, что иммунитет к коронавирусу кратковременный. Чтобы установить, насколько стойкий иммунитет после перенесенной коронавирусной инфекции, необходимы углубленные иммунологические исследования.

Какой титр антител к коронавирусу считается достаточным? По причине отсутствия точных данных, подтвержденных клиническими исследованиями, нельзя говорить и о достаточном для дальнейшей защиты от повторного заражения титре антител к коронавирусу. Основываясь на общих закономерностях, характерных для вирусных инфекций, напрашивается вывод, что после перенесенной инфекции при повторном заражении иммунная система формирует антитела быстрее. Это значит, что при повторном инфицировании болезнь будет протекать легче.

На заметку: Считается, что результаты иммуноферментного анализа отличаются высокой точностью, но иногда (например, при перекрестной реакции с другими коронавирусами) анализ может показать ложноположительный результат. Ложноотрицательные результаты возникают и из-за недостаточной чувствительности теста. Во всех сомнительных случаях обязательно ПЦР-тестирование.

Какие показания для проведения диагностики COVID-19 с помощью ИФА?

Сдать кровь на антитела к коронавирусу необходимо в следующих случаях:

• для диагностирования активной стадии заболевания при наличии респираторных симптомов;
• для исключения заражения при установленном контакте с заболевшим;
• для уточнения диагноза заболевания при слабо выраженной симптоматике;
• для диагностики скрытых форм (носительства) коронавирусной инфекции;
• для того чтобы узнать, переболел ли человек COVID-19 и сформировался ли у него иммунитет к коронавирусу, в том числе при бессимптомном течении заболевания;
• при отборе донора для переливания крови пациентам с тяжелым течением коронавирусной инфекции.

Почему в частных лабораториях до сих пор нет тестов на антитела к коронавирусу?

Чтобы появилась возможность пройти тесты на антитела платно в частной лаборатории, необходимо зарегистрировать эти тест-системы. На сегодня, по словам представителей частных лабораторий, таких зарегистрированных систем нет. Таким образом, частные лаборатории не имеют права закупить незарегистрированные тест-системы и оказывать услуги на платной основе. Дистрибьюторы должны получить регистрационное удостоверение для оптовой реализации, некоторые это уже пытаются сделать, но когда разрешение может быть получено — сказать сложно, ускоренной процедуры, как объясняет один из дистрибьюторов, не предусмотрено.

— Мы находимся на этапе регистрации высокочувствительных тестов на антитела, которые будут определяться методом автоматического иммунохемилюминесцентного анализа. Это не экспресс-тесты. Да, мы планируем, что результаты будут готовы через 25 минут, но такие тесты смогут сделать только те лаборатории, где установлен наш прибор. Пока мы регистрационное удостоверение не получили, — говорит заместитель директора одной из компаний-дистрибьюторов Ольга Тельпук.

Как получить точный результат теста

Наиболее достоверные ответы о наличии патогена в организме человека даёт ПЦР-тестирование. Метод позволяет выявить патоген даже без проявления симптомов. Однако мазки на исследование должны брать медсотрудники в больницах или медики скорой помощи. Для анализа они забирают биоматериал из носа и горла, а сам тест делается около 1-2 дней.

В редких случаях диагностика может давать неверное заключение. И причиной этому может стать обычная чистка зубов или приём пищи. Чтобы исследование было максимально точным, медики советуют придерживаться нескольких правил:

• за 6 часов до теста не принимать лекарственные препараты для орошения носоглотки и рассасывания;
• за 3 часа до теста лучше отказаться от чистки зубов, полоскания рта, еды и питья.